[發明專利]一種提高發狀念珠藻胞外多糖體外抗氧化活性和生物絮凝性的方法

有效

• 申請號: 202210045530.2
• 申請日: 2022-01-15
• 公開（公告）號: CN114410708B
• 公開（公告）日: 2023-09-29
• 發明（設計）人: 高翔;袁曉龍;劉暢
• 申請（專利權）人: 陜西科技大學
• 主分類號: C12P19/04
• 分類號: C12P19/04;C12N1/38;C12N1/20;C08B37/00;C12R1/89
• 代理公司: 西安通大專利代理有限責任公司 61200
• 代理人: 范巍

1.一種提高發狀念珠藻胞外多糖體外抗氧化活性和生物絮凝性的方法，其特征在于，包括如下步驟：

步驟1，將發狀念珠藻接種到BG11液體培養基中，加入氧化石墨烯水溶液，使氧化石墨烯的濃度為15mg/L，得到培養體系；

步驟2，將培養體系在日光燈下進行恒溫搖床培養，之后將所得培養液中的胞外多糖依次進行提取和純化，得到發狀念珠藻胞外多糖。

2.根據權利要求1所述的一種提高發狀念珠藻胞外多糖體外抗氧化活性和生物絮凝性的方法，其特征在于，步驟2所述的培養體系在恒溫搖床培養期間，溫度為24-26℃，光強為40-45μmolphotons?m^-2s^-1。

3.根據權利要求1所述的一種提高發狀念珠藻胞外多糖體外抗氧化活性和生物絮凝性的方法，其特征在于，步驟2所述的培養體系在恒溫搖床培養期間，轉速為120-140rpm。

4.根據權利要求1所述的一種提高發狀念珠藻胞外多糖體外抗氧化活性和生物絮凝性的方法，其特征在于，步驟2所述的培養體系恒溫搖床培養10-20天。

5.根據權利要求1所述的一種提高發狀念珠藻胞外多糖體外抗氧化活性和生物絮凝性的方法，其特征在于，步驟2按如下過程將所得培養液中的胞外多糖依次進行提取和純化：

將所述的培養液在80-95℃下加熱45-75min，得到混合液A，之后將混合液A離心后收集上清液，在上清液中加入乙醇進行沉降，然后將乙醇去除，剩余溶液冷凍干燥，得到粗胞外多糖，使用Sevage溶液除去粗胞外多糖中的蛋白質，最后將所得的混合物利用層析柱進行純化。

6.根據權利要求5所述的一種提高發狀念珠藻胞外多糖體外抗氧化活性和生物絮凝性的方法，其特征在于，使用所述的Sevage溶液按如下過程除去粗胞外多糖中的蛋白質，得到所述的混合物：

按200mg：4mL：1mL的比例，將粗胞外多糖、去離子水和Sevage溶液振蕩后靜置，分離得到上清液，之后去除上清液中的Sevage溶液，將剩余溶液冷凍干燥，得到所述的混合物。

7.根據權利要求6所述的一種提高發狀念珠藻胞外多糖體外抗氧化活性和生物絮凝性的方法，其特征在于，按如下過程將所得的混合物利用層析柱進行純化：

將所得的混合物用去離子水配制成溶液，之后倒入層析柱內，依次加入蒸餾水和NaCl溶液進行洗脫，將洗脫液旋蒸濃縮后進行透析和冷凍干燥，完成所得混合物的純化，得到發狀念珠藻胞外多糖。