[發明專利]一種磁性細胞及其制備方法和應用

在審

• 申請號: 202210043808.2
• 申請日: 2022-01-14
• 公開（公告）號: CN116478900A
• 公開（公告）日: 2023-07-25
• 發明（設計）人: 賈潔敏;金玉曉;冀波濤;黨波波;李競航;施佩君
• 申請（專利權）人: 西湖大學
• 主分類號: C12N5/00
• 分類號: C12N5/00;C12N5/071;C12N5/078;A01K67/027
• 代理公司: 北京金信知識產權代理有限公司 11225
• 代理人: 李維盈;范繼晨

1.一種磁性細胞，其中，所述細胞的細胞膜上結合有磁性納米顆粒，使得所述細胞具有感應磁場的能力。

2.根據權利要求1所述的磁性細胞，其中，

所述細胞選自可以進行體外人工修飾的細胞，例如，紅細胞、白細胞、血小板、癌細胞、胚胎干細胞、多能誘導干細胞，優選為紅細胞；和/或

所述磁性納米顆粒的平均直徑為100～500nm，優選為200-300nm；和/或

所述磁性納米顆粒是選自鐵、鈷、鎳或其氧化物的納米粒子，優選為具有生物兼容性的磁性納米顆粒，特別是PEG或SiO₂包被的磁性納米顆粒，特別地，所述磁性納米顆粒是四氧化三鐵納米粒子。

3.根據權利要求1所述的磁性細胞，其中，

磁性納米顆粒與細胞的比例為0.3-4pg/細胞，優選0.5-1.5pg/細胞；和/或

通過選自鏈霉親和素/生物素偶聯反應、脂質體介導、抗原抗體反應中的一種或多種方法，使得磁性納米顆粒結合到細胞的細胞膜上。

4.根據權利要求1-3任一項所述的磁性細胞，其中，所述磁性細胞采用如下方法一或二制備：

方法一，包括如下步驟：

(1)將偶聯生物素的特異性識別細胞膜蛋白的抗體與細胞孵育，以獲得帶有生物素的細胞，

(2)將所述帶有生物素的細胞與鏈霉親和素修飾的磁性納米顆粒孵育，通過鏈霉親和素和生物素之間的相互作用將磁性納米顆粒連接到細胞膜上，

優選地，所述細胞為紅細胞，所述特異性識別細胞膜蛋白的抗體為抗Ter119抗體，所述磁性納米顆粒是具有生物兼容性的四氧化三鐵納米粒子；

方法二，包括如下步驟：將含有轉染試劑的溶液與含有磁性納米顆粒的溶液混合，然后與細胞孵育，使得磁性納米顆粒結合到細胞的細胞膜上；

優選地，所述轉染試劑為脂質體轉染劑，例如lipofectamine?2000或3000；

特別地，方法二包括如下步驟：由lipofectamine?3000和HBSS組成混合物A液，由HBSS和磁性納米顆粒組成混合B液，將混合物A液和混合B液混合，然后與細胞孵育，使得磁性納米顆粒結合到細胞的細胞膜上。

5.一種磁性細胞的制備方法，其包括使磁性納米顆粒結合到細胞膜上的步驟。

6.根據權利要求5所述的制備方法，其中，

所述細胞選自可以進行體外人工修飾的細胞，例如，紅細胞、白細胞、血小板、癌細胞、胚胎干細胞、多能誘導干細胞；和/或

所述磁性納米顆粒的平均直徑為100～500nm，優選為200-300nm；和/或

磁性納米顆粒與細胞的比例為0.3-4pg/細胞，優選0.5-1.5pg/細胞；和/或

所述磁性納米顆粒是選自鐵、鈷、鎳或其氧化物的納米粒子，優選為具有生物兼容性的磁性納米顆粒，特別是PEG或SiO₂包被的磁性納米顆粒，特別地，所述磁性納米顆粒是四氧化三鐵納米粒子；和/或

通過選自鏈霉親和素/生物素偶聯反應、脂質體介導、抗原抗體反應中的一種或多種方法，使得磁性納米顆粒結合到細胞的細胞膜上。