[發明專利]一種促進不結球白菜開花的基因及其載體、重組菌和應用

有效

• 申請號: 202210042536.4
• 申請日: 2022-01-14
• 公開（公告）號: CN114634937B
• 公開（公告）日: 2022-12-16
• 發明（設計）人: 袁凌云;吳穎;汪承剛;侯金鋒;朱世東;陳國戶;唐小燕
• 申請（專利權）人: 安徽農業大學;安徽省皖江蔬菜產業技術研究院有限責任公司
• 主分類號: C12N15/29
• 分類號: C12N15/29;C12N15/84;C12N1/21;A01H6/20;A01H5/02;C12R1/01
• 代理公司: 合肥興東知識產權代理有限公司 34148
• 代理人: 王偉

本發明涉及植物分子生物學和基因工程技術領域，提供了一種促進不結球白菜開花的基因，核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。本發明還提供了一種包括上述促進不結球白菜開花的基因的載體與包括上述基因的重組菌。同時，本發明還提供了一種上述促進不結球白菜開花的基因在培育早開花的轉基因植株方面的應用。本發明提供的DREB2B基因能夠促進不結球白菜植株提早抽薹開花，從而縮短育種周期，為培育早開花不結球白菜品種提供理論依據。

技術領域

本發明涉及植物分子生物學和基因工程技術領域，尤其涉及一種促進不結球白菜開花的基因及其載體、重組菌和應用。

背景技術

不結球白菜(Brassica campestris L.ssp.chinensis var.rosularis Tsen)是十字花科蕓薹屬白菜的一個變種，有著豐富的遺傳資源，不同品種的開花時間存在廣泛差異。

開花是植物生長發育過程中重要的轉折點，也是植物由營養生長向生殖生長轉化的重要標志。對于一些不結球白菜晚花品種而言，其花期嚴重影響其育種周期。在雜交育種過程中，若花期不能相遇，會導致育種失敗。

據此，目前急需展開對促進不結球白菜提早開花的研究，從而為培育出早花的不結球白菜品種提供理論依據，而這對縮短不結球白菜的育種周期具有重要意義。

發明內容

本發明所要解決的技術問題在于提供一種促進不結球白菜開花的基因及其載體、重組菌和應用。

本發明采用以下技術方案解決上述技術問題：

本發明首先提供一種促進不結球白菜開花的基因，所述基因的核苷酸序列如SEQID NO.1所示。

作為本發明的優選方式之一，所述基因的克隆步驟如下：提取不結球白菜總RNA并反轉錄成cDNA；設計特異性擴增引物DREB2B-F和DREB2B-R；以cDNA為模板進行PCR擴增，得目的基因DREB2B；其中，特異性擴增引物DREB2B-F和DREB2B-R的核苷酸序列分別如SEQ IDNO.2、SEQ ID NO.3所示。

本發明還提供一種上述促進不結球白菜開花的基因在培育早開花的轉基因植株方面的應用。

本發明還提供一種重組載體，所述重組載體包括上述促進不結球白菜開花的基因。

作為本發明的優選方式之一，所述重組載體具體為pCambia1305-35S-BrDREB2B-nFLAG-cMYC。

作為本發明的優選方式之一，所述重組載體的構建方法如下：將促進不結球白菜開花的基因DREB2B插入到載體pCambia1305-35S-nFLAG-cMYC的酶切位點，再通過連接酶連接。

作為本發明的優選方式之一，所述載體pCambia1305-35S-nFLAG-cMYC的酶切位點是BamHI和XbaI。

本發明還提供一種重組菌，所述重組菌包括上述促進不結球白菜開花的基因。

作為本發明的優選方式之一，所述重組菌的構建方法如下：將促進不結球白菜開花的基因構建的重組載體pCambia1305-35S-BrDREB2B-nFLAG-cMYC導入菌體。

本發明相比現有技術的優點在于：本發明提供的DREB2B基因能夠促進不結球白菜植株提早抽薹開花，從而縮短育種周期，為培育早開花不結球白菜品種提供理論依據。

附圖說明

圖1是實施例4中篩選出的野生型植株與轉基因植株在培養皿中的培養狀態圖(圖1a為野生型對照植株，圖1b為抗性板上篩選得到的轉基因植株)；

圖2是實施例4中擬南芥植物的野生型和過表達轉基因系中BrDREB2B基因表達量對比圖；