[發(fā)明專利]一種酵母菌與紅曲霉的共培養(yǎng)促進(jìn)紅曲霉產(chǎn)孢的方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202210033335.8
• 申請(qǐng)日: 2022-01-12
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN114395492B
• 公開(kāi)（公告）日: 2023-09-05
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 付瑞燕;謝嬌嬌
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)
• 主分類(lèi)號(hào): C12N1/16
• 分類(lèi)號(hào): C12N1/16;C12N1/14;C12R1/645
• 代理公司: 合肥興東知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 34148
• 代理人: 商德平

1.?一種酵母菌與紅曲霉的共培養(yǎng)促進(jìn)紅曲霉產(chǎn)孢的方法，其特征在于，將費(fèi)比恩塞伯林德納氏酵母SHBCC?D?54233菌株與ATCC?58045菌株按接種比1:1混合，并與紅曲霉在平板上共培養(yǎng)。

2.?根據(jù)權(quán)利要求1所述的酵母菌與紅曲霉的共培養(yǎng)促進(jìn)紅曲霉產(chǎn)孢的方法，其特征在于，包括如下具體步驟：

（1）種子液的制備

兩種酵母菌種子液的制備：將兩種費(fèi)比恩塞伯林德納氏酵母菌株分別接種至麥?zhǔn)吓囵B(yǎng)基，并進(jìn)行振蕩培養(yǎng)；

紅曲霉種子液的制備：將紅曲霉孢子懸液接種至紅曲霉種子培養(yǎng)基，并進(jìn)行振蕩培養(yǎng)；

（2）酵母菌與紅曲霉共培養(yǎng)

在配制好的紅曲霉平板培養(yǎng)基中心挖孔，并用瓊脂液填平孔底；待瓊脂液凝固后，以上述孔為中心，采用三點(diǎn)法，將紅曲霉種子液接種至紅曲霉平板上；接著，取兩種酵母菌種子液接入上述孔中，其中，兩種酵母菌種子液的接種比為體積比1:1；最后，將接種完成的紅曲霉平板靜置培養(yǎng)。

3.?根據(jù)權(quán)利要求2所述的酵母菌與紅曲霉的共培養(yǎng)促進(jìn)紅曲霉產(chǎn)孢的方法，其特征在于，所述步驟（1）中，以2%的接種量將兩種費(fèi)比恩塞伯林德納氏酵母菌株分別接種至麥?zhǔn)吓囵B(yǎng)基中，并于30℃、150?r/min下振蕩培養(yǎng)20~32?h備用。

4.?根據(jù)權(quán)利要求2所述的酵母菌與紅曲霉的共培養(yǎng)促進(jìn)紅曲霉產(chǎn)孢的方法，其特征在于，所述步驟（1）中，麥?zhǔn)吓囵B(yǎng)基配方為：葡萄糖1?g，酵母浸粉2.5?g，無(wú)水乙酸鈉8.2?g，氯化鉀1.8?g，定容于1?L水中。

5.?根據(jù)權(quán)利要求2所述的酵母菌與紅曲霉的共培養(yǎng)促進(jìn)紅曲霉產(chǎn)孢的方法，其特征在于，所述步驟（1）中，以3%的接種量將濃度為5×10⁶?CFU/mL的紅曲霉孢子懸液接種至紅曲霉種子培養(yǎng)基中，32℃、150r/min下振蕩培養(yǎng)48?h備用。

6.?根據(jù)權(quán)利要求2所述的酵母菌與紅曲霉的共培養(yǎng)促進(jìn)紅曲霉產(chǎn)孢的方法，其特征在于，所述步驟（1）中，紅曲霉培養(yǎng)基配方為：葡萄糖60?g，蛋白胨20?g，可溶性淀粉30?g，定容于1?L水中。

7.?根據(jù)權(quán)利要求2所述的酵母菌與紅曲霉的共培養(yǎng)促進(jìn)紅曲霉產(chǎn)孢的方法，其特征在于，所述步驟（2）中，在配制好的紅曲霉平板中心用1?mL槍頭挖孔，并用30?μL瓊脂液填平孔底；待瓊脂液凝固后，以上述孔為中心，采用三點(diǎn)法，將紅曲霉種子液以15?μL的接種量接種至紅曲霉平板上；取80?μL總量的酵母菌種子液接入上述孔中，其中，兩種酵母菌種子液的接種比為體積比1:1；最后，將接種完成的紅曲霉平板置于32℃下靜置培養(yǎng)。

8.?根據(jù)權(quán)利要求2所述的酵母菌與紅曲霉的共培養(yǎng)促進(jìn)紅曲霉產(chǎn)孢的方法，其特征在于，所述步驟（2）中，紅曲霉平板培養(yǎng)基配方為：葡萄糖60?g，蛋白胨20?g，可溶性淀粉30?g，瓊脂15g，定容于1?L水中。

9.?根據(jù)權(quán)利要求2~8任一所述的酵母菌與紅曲霉的共培養(yǎng)促進(jìn)紅曲霉產(chǎn)孢的方法，其特征在于，酵母菌與紅曲霉共培養(yǎng)后，通過(guò)以下方法測(cè)定紅曲霉平板培養(yǎng)基上的紅曲霉產(chǎn)孢量：酵母菌與紅曲霉共培養(yǎng)7?d后，將平板中央的混菌區(qū)挖出，并用瓊脂填充；接著，用5mL含有0.05%吐溫80的生理鹽水洗下平板上的孢子，取3?mL孢子液用血球計(jì)數(shù)板進(jìn)行計(jì)數(shù)；計(jì)數(shù)兩次，取平均值。