[發(fā)明專(zhuān)利]miR-204-5p mimics或miR-204-3p mimics在制備治療動(dòng)脈粥樣硬化的藥物中的應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202210033057.6
• 申請(qǐng)日: 2022-01-12
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN114272257B
• 公開(kāi)（公告）日: 2022-11-04
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 梁思佳;劉秀
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 中山大學(xué)
• 主分類(lèi)號(hào): A61K31/7105
• 分類(lèi)號(hào): A61K31/7105;C12Q1/6883;A61P9/10
• 代理公司: 廣州三環(huán)專(zhuān)利商標(biāo)代理有限公司 44202
• 代理人: 費(fèi)雯

本發(fā)明涉及心血管疾病領(lǐng)域，尤其涉及一種miR?204在診斷或治療動(dòng)脈粥樣硬化中的應(yīng)用。本發(fā)明首次發(fā)現(xiàn)，miR?204有著“一石二鳥(niǎo)”的功效，它的兩個(gè)成熟體，miR?204?5p和miR?204?3p分別在細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核通過(guò)不同的機(jī)制抑制清道夫受體的表達(dá)，胞質(zhì)中的miR?204?5p通過(guò)經(jīng)典種子序列靶向抑制SR?A表達(dá)，而miR?204?3p在細(xì)胞核抑制H3K27ac和H3K4me3在CD36啟動(dòng)子上的富集從而抑制CD36的轉(zhuǎn)錄。miR?204通過(guò)以上途徑，雙管齊下，抑制巨噬細(xì)胞泡沫化和動(dòng)脈粥樣硬化。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及心血管疾病領(lǐng)域，尤其涉及一種miR-204在診斷或治療動(dòng)脈粥樣硬化中的應(yīng)用。

背景技術(shù)

動(dòng)脈粥樣硬化(athersclerosis，AS)是一種常見(jiàn)的慢性代謝性心腦血管疾病，也是眾多心腦血管疾病的病理基礎(chǔ)，而AS引發(fā)的急性心肌梗死和腦卒中致死率極高，已成為威脅人類(lèi)健康的主要疾病之一。因此，AS的防治一直是基礎(chǔ)和臨床研究的熱點(diǎn)之一。

AS的病因和發(fā)病機(jī)制非常復(fù)雜，其形成經(jīng)過(guò)了一系列復(fù)雜的過(guò)程，主要過(guò)程有巨噬細(xì)胞的泡沫化、脂質(zhì)在內(nèi)皮下沉積、內(nèi)皮下炎癥細(xì)胞的浸潤(rùn)、脂質(zhì)壞死核心形成、血管平滑肌細(xì)胞的增殖和遷移等。AS最先形成于血管的內(nèi)膜層， AS病程早期，在高脂血癥、高血壓和高血糖等各種致病因素下，血液中的氧化低密度脂蛋白(oxidative modified densitylipoprotein，oxLDL)在血管內(nèi)皮下聚集，刺激內(nèi)皮細(xì)胞分泌炎性因子，進(jìn)一步招募血液中的單核細(xì)胞在內(nèi)皮下聚集和粘附，在趨化因子等細(xì)胞因子作用下，單核細(xì)胞分化形成巨噬細(xì)胞。巨噬細(xì)胞在內(nèi)膜下通過(guò)細(xì)胞膜上的SR-A、CD36等清道夫受體大量吞噬以oxLDL顆粒為主的脂質(zhì)，在細(xì)胞內(nèi)形成脂滴儲(chǔ)存起來(lái)，巨噬細(xì)胞進(jìn)一步轉(zhuǎn)變?yōu)榕菽?xì)胞。泡沫細(xì)胞過(guò)度攝取oxLDL為主脂質(zhì)使細(xì)胞凋亡壞死，脂質(zhì)被釋放后堆積在內(nèi)皮層，形成AS的早期特征脂質(zhì)條紋。隨著AS病程進(jìn)展，內(nèi)皮細(xì)胞和平滑肌細(xì)胞攝取oxLDL為主的脂質(zhì)，過(guò)度的脂質(zhì)在細(xì)胞內(nèi)堆積導(dǎo)致細(xì)胞凋亡和壞死，脂質(zhì)和壞死的細(xì)胞碎片等堆積在血管壁上，逐漸形成粥樣斑塊的脂質(zhì)核心。粥樣斑塊導(dǎo)致血管管腔變窄，阻礙血流，使血管壁硬化。且泡沫細(xì)胞分泌大量水解酶使得斑塊穩(wěn)定性下降極易從血管壁脫落，形成血栓，進(jìn)而導(dǎo)致腦中風(fēng)和急性心肌梗死等心血管疾病。

由此可見(jiàn)，AS發(fā)生的核心是粥樣斑塊的形成，而巨噬細(xì)胞攝取過(guò)度oxLDL 轉(zhuǎn)化為泡沫細(xì)胞是粥樣斑塊形成的重要過(guò)程，巨噬細(xì)胞泡沫化在AS進(jìn)程中發(fā)揮著關(guān)鍵作用。巨噬細(xì)胞攝取oxLDL主要是取決于其細(xì)胞膜上清道夫受體的表達(dá)量，如CD36和SR-A等清道夫受體的表達(dá)量。臨床上手術(shù)治療AS的主要方法包括藥物洗脫支架和藥物涂層球囊。藥物現(xiàn)有治療AS的方案主要降低血脂水平，使用他汀類(lèi)、依折麥布、前蛋白轉(zhuǎn)換酶枯草溶菌素Kexin9型抑制劑、貝特類(lèi)藥物降低氧化低密度脂蛋白膽固醇的水平。但目前并無(wú)特效藥能降低細(xì)胞對(duì)于氧化低密度脂蛋白膽固醇的攝取。如果能從降低細(xì)胞攝入氧化低密度脂蛋白角度提供新的治療策略，對(duì)于AS的防治有重要意義。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于克服現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供一種miR-204在診斷或治療動(dòng)脈粥樣硬化中的應(yīng)用。

本發(fā)明發(fā)現(xiàn)，臨床上與正常對(duì)照組相比，AS病人的外周血單核細(xì)胞中 microRNA204(簡(jiǎn)寫(xiě)為miR-204)表達(dá)降低，且miR-204能有效降低巨噬細(xì)胞膜上清道夫受體的表達(dá)，因此降低了巨噬細(xì)胞對(duì)于oxLDL的攝取，從而抑制巨噬細(xì)胞的脂質(zhì)沉積和泡沫化。Pre-miR-204是miR-204前體，它是miR-204的一種存在形式。Pre-miR-204經(jīng)過(guò)Dicer酶酶切成為長(zhǎng)約20～24nt的兩個(gè)成熟體，即miR-204-5p和miR-204-3p。miR-204有著“一石二鳥(niǎo)”的功效。一方面， miR-204-5p通過(guò)經(jīng)典途徑在胞漿靶向SR-A 3'-UTR抑制SR-A的表達(dá)。另一方面，miR-204-3p則在核內(nèi)影響CD36組蛋白修飾進(jìn)而抑制其轉(zhuǎn)錄激活，從而降低CD36的表達(dá)。miR-204將作為一種新型的藥物作用靶點(diǎn)，檢測(cè)外周血液 miR-204可以作為一種新的生物標(biāo)志物在AS疾病的診斷和預(yù)防。