[發(fā)明專利]一種早期胃癌診斷標(biāo)志物及其應(yīng)用

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202210028944.4
• 申請(qǐng)日: 2022-01-11
• 公開（公告）號(hào): CN116463416A
• 公開（公告）日: 2023-07-21
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 范建兵;陳尚;余燕琪
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 南方醫(yī)科大學(xué)
• 主分類號(hào): C12Q1/6886
• 分類號(hào): C12Q1/6886;C12N15/11
• 代理公司: 廣州廣典知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 44365
• 代理人: 萬志香

本發(fā)明屬于醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)技術(shù)領(lǐng)域。本發(fā)明公開了一種新的用于診斷胃癌的特異性生物標(biāo)志物microRNA?330?5p和檢測(cè)方法，所述生物標(biāo)志物microRNA?330?5p在用于胃癌檢測(cè)時(shí)具有很好的靈敏度和特異性，尤其適用于早期胃癌的篩查，能滿足臨床上對(duì)早期胃癌的診斷需求，實(shí)現(xiàn)早確診早治療，提高患者的5年生存率。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及醫(yī)學(xué)檢測(cè)領(lǐng)域，特別是涉及一種早期胃癌診斷標(biāo)志物及其應(yīng)用。

背景技術(shù)

胃癌指源于胃黏膜上皮畑胞的惡性腫瘤，主要是胃腺癌，好發(fā)于中、老年人，發(fā)病高峰年齡在50-80歲，并呈逐年年輕化趨勢(shì)，是全球高發(fā)的惡性腫瘤之一。胃癌可由多種因素影響，在慢性胃炎等各種胃部疾病，或幽門螺旋桿菌(Hp)感染，以及不良飲食習(xí)慣、環(huán)境和遺傳等多種因素的作用下，都可導(dǎo)致胃癌的發(fā)生。胃癌的發(fā)病率隨著年齡的增加而顯著增高，發(fā)病的高峰年齡在50～80歲。我國是胃癌的高發(fā)區(qū)，發(fā)病率高達(dá)40/10萬，僅次于肺癌，已經(jīng)躍居中國癌癥發(fā)病率的第二位，胃癌年患病率和死亡率均是世界平均水平的2倍多。胃癌占癌癥死亡人數(shù)接近四分之一，缺乏早期診斷的方法以及容易產(chǎn)生耐藥是其高致死率背后的主要原因。

依據(jù)TNM分期判定標(biāo)準(zhǔn)，胃癌可分Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ期。Ⅰ期為最早，Ⅳ期最晚。我們常聽說的早期胃癌僅指第Ⅰ期，其余均稱之為中晚期胃癌(又稱為進(jìn)展期胃癌)。早期胃癌無明顯癥狀，隨病情進(jìn)展逐漸出現(xiàn)消化不良等胃部不適癥狀，胃癌早期癥狀多缺乏特異性，早期病例僅占胃癌手術(shù)病例的10％～20％，大約2/3的患者在確診時(shí)已處于中晚期或出現(xiàn)淋巴結(jié)、血行轉(zhuǎn)移，其5年生存率僅為20％～30％，而早期胃癌的5年生存率可達(dá)90％以上。因此，早診斷早治療可以有效提高患者的生存率，減輕患者痛苦和社會(huì)經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)。但是目前，胃癌的早期的發(fā)現(xiàn)率低，這主要與早期胃癌的癥狀不明顯以及目前尚缺乏有效的早期胃癌檢測(cè)手段有關(guān)。

目前對(duì)胃癌的檢測(cè)方法主要包括：(1)早期胃癌三項(xiàng)檢測(cè)：檢測(cè)胃部腺體分泌的三種物質(zhì)，即血清胃蛋白酶原Ⅰ、血清胃蛋白酶原Ⅱ，以及血清胃泌素17，能夠反映胃部的萎縮情況，有助于胃癌早期的防治，但敏感度不高，存在漏檢；(2)血清腫瘤標(biāo)志物檢測(cè)：結(jié)合癌胚抗原、癌抗原CA19-9、CA724、CA125等的檢查，但這些傳統(tǒng)標(biāo)志物多在胃癌晚期才明顯升高，所以診斷胃癌的陽性率較低，多在40％以下，且不適用于早期胃癌的檢測(cè)；(3)胃鏡檢查：是目前診斷胃癌的“金標(biāo)準(zhǔn)”，大多數(shù)胃癌通過內(nèi)鏡檢查加活檢，能得到正確診斷，但仍有少部分胃癌，特別是小胃癌或微小胃癌可能被漏診，且在胃鏡檢查過程中患者依從性差，不適反應(yīng)多，限制了其作為胃癌篩查的臨床應(yīng)用；(4)影像學(xué)檢查：包括CT檢查、PET-CT檢查、超聲胃鏡、X線鋇餐等，但早期胃癌和癌前病變的影像學(xué)表現(xiàn)常缺乏特異性，故其在發(fā)現(xiàn)早期胃癌及微小病灶方面有一定的局限性；(5)病理活檢：取一小部分組織做病理活檢，鏡下觀察是否有癌細(xì)胞的存在，明確是否癌變，此方法為侵入式，患者依從性差，且不適用于胃癌的早期篩查。因此，尋找靈敏度高、特異性好、取材方便和適用性廣的早期胃癌特異性生物學(xué)靶標(biāo)成為胃癌防治迫切需要解決的問題。

MicroRNA(miRNA)是一類內(nèi)生的長度約為20～24個(gè)核苷酸的小RNA，其在細(xì)胞分化、生物發(fā)育及疾病發(fā)生發(fā)展過程中發(fā)揮巨大作用。據(jù)推測(cè)，miRNA調(diào)節(jié)著人類三分之一的基因，每個(gè)miRNA可以有多個(gè)靶基因，而幾個(gè)miRNA也可以調(diào)節(jié)同一個(gè)基因。miRNA存在多種形式，最原始的是pri-miRNA，長度大約為300～1000個(gè)堿基；pri-miRNA經(jīng)過一次加工后，成為pre-miRNA即microRNA前體，長度大約為70～90個(gè)堿基；pre-miRNA再經(jīng)過Dicer酶酶切后，成為長約20～24nt的成熟miRNA。研究表明miRNAs參與生命過程中一系列的重要進(jìn)程，包括早期發(fā)育、細(xì)胞增殖、細(xì)胞凋亡、細(xì)胞死亡、脂肪代謝和細(xì)胞分化等，其在多種疾病中存在異常表達(dá)。隨著對(duì)于miRNA作用機(jī)制的進(jìn)一步的深入研究，以及利用miRNA芯片等高通量的技術(shù)手段對(duì)miRNA和疾病之間的關(guān)系進(jìn)行研究，越來越多的miRNA正被發(fā)現(xiàn)可成為疾病診斷的特異性生物標(biāo)記物，包括腫瘤、自身免疫性疾病、炎癥性疾病和感染性疾病等。