[發明專利]茶黃素在制備抗豬鏈球菌藥物中的應用

在審

• 申請號: 202210028186.6
• 申請日: 2022-01-11
• 公開（公告）號: CN114288287A
• 公開（公告）日: 2022-04-08
• 發明（設計）人: 高婷;田永祥;袁芳艷;葉飛;劉澤文;劉威;周丹娜;楊克禮;郭銳;譚美芳
• 申請（專利權）人: 湖北省農業科學院畜牧獸醫研究所
• 主分類號: A61K31/353
• 分類號: A61K31/353;A61P31/04
• 代理公司: 武漢宇晨專利事務所(普通合伙) 42001
• 代理人: 龔瑩瑩

本發明屬于獸藥技術領域，公開了茶黃素在制備抗豬鏈球菌藥物中的應用。申請人發現，茶黃素具有抑制豬鏈球菌生長和殺滅豬鏈球菌的作用，其對豬鏈球菌的最小抑菌濃度為512μg/ml、最小殺菌濃度為2048μg/ml，克服了疫苗、化藥、抗生素的毒副作用與食品安全隱患，在食品加工、醫藥、養殖業領域具有廣闊的應用前景和開發價值。

技術領域

本發明屬于獸藥技術領域，具體涉及茶黃素在制備抗豬鏈球菌藥物中的應用。

背景技術

豬鏈球菌是一種人畜共患的傳染病病原菌，能引起腦膜炎、敗血癥、關節炎、心內膜炎、肺炎，導致豬甚至人的感染死亡。豬鏈球菌病不僅對養豬業造成了重大的經濟損失，而且對人類公共衛生安全構成了巨大威脅。根據細菌莢膜多糖抗原特異性的不同，豬鏈球菌被分為33種血清型，在眾多血清型中，豬鏈球菌2型、7型、馬鏈球菌獸疫亞種是經常從病死豬中分離出來的優勢血清型。

控制豬鏈球菌病的重點是預防為主，兼以抗生素治療。然而豬鏈球菌血清型眾多，一種疫苗難以提供全面的保護。而隨著抗生素的大量、不合理使用，導致細菌性病原的耐藥性非常嚴重。臨床實驗數據顯示，不同國家和地區分離的豬鏈球菌都出現了不同程度的耐藥性。中國學者王治方臨床分離了68株豬鏈球菌，除對頭孢噻呋、頭孢他啶、阿莫西林和氨芐西林敏感性較好外，對其他5類13種抗菌藥物均高度耐藥，且存在嚴重的多重耐藥現象。中國學者譚美芳從臨床健康豬中共采集鼻拭子標本314份，豬鏈球菌陽性分離率為34.08％。抗菌藥物敏感性試驗表明，80％以上的菌株對萬古霉素、青霉素、米諾環素和氯霉素敏感，對克林霉素、四環素、克拉霉素和紅霉素耐藥率較高。所有的分離菌株對三種或三種以上的抗菌素都有耐藥性。法國學者Marie分離的豬鏈球菌中，幾乎所有的菌株都對青霉素G、阿莫西林、頭孢噻呋、氟苯尼考、慶大霉素、桿菌肽鋅敏感，耐藥性最為嚴重的是多西環素、大環內酯類以及林可胺類抗生素。韓國學者Dong檢測了本國豬體內分離到的55株豬鏈球菌對于臨床常用的四環素、慶大霉素和壯觀霉素均耐藥。

目前，申請專利《茶黃素-雙沒食子酸酯在制備MBLs抑制劑中的醫用用途》(專利號為201810802295.2)，已公開茶黃素-雙沒食子酸酯(分子式：C43H32O20，分子量：868.70)能夠抑制B類β-內酰胺酶的活性，恢復多種β-內酰胺類抗生素對耐甲氧西林金黃色葡萄球菌BAA1717的殺菌活性。具體實施方式涉及茶黃素-雙沒食子酸酯與頭孢硝噻吩(β-內酰胺類抗生素)共同孵育時能夠劑量依賴性地抑制B類β-內酰胺酶的活性，具體實施方式涉及茶黃素-雙沒食子酸酯與頭孢硝噻吩聯用對耐甲氧西林金黃色葡萄球菌BAA1717的最小抑菌濃度(MIC)，沒有涉及最小殺菌濃度(MBC)，并且時間-殺菌實驗沒有說明頭孢噻吩和茶黃素-雙沒食子酸酯分別單獨使用或聯合使用的藥物濃度，時間-殺菌實驗中頭孢噻吩和茶黃素-雙沒食子酸酯分別單獨使用或聯合使用不能殺死耐甲氧西林金黃色葡萄球菌BAA1717，只說明能影響菌體的生長速度。在試驗例4小鼠金黃色葡萄球菌肺炎模型治療學研究中，頭孢噻吩治療組每只小鼠皮下注射0.325mg，茶黃素-雙沒食子酸酯治療組每只皮下注射1mg，聯合用藥組每只小鼠同時皮下注射頭孢噻吩0.325mg和茶黃素-雙沒食子酸酯1mg，并且12小時候重復給藥，與試驗例2中茶黃素-雙沒食子酸酯體外最小抑菌濃度0.004mg相差甚遠，結果表明茶黃素-雙沒食子酸酯與頭孢噻吩聯用組顯著的降低了金葡感染小鼠的死亡率，存活率在80％左右，而單獨使用頭孢噻吩0.325mg和茶黃素-雙沒食子酸酯1mg不能很好地降低死亡率。綜述所述，并沒有說明茶黃素-雙沒食子酸酯具備抑制耐甲氧西林金黃色葡萄球菌BAA1717效果，而是在抑制耐甲氧西林金黃色葡萄球菌BAA1717的B類β-內酰胺酶的活性。

茶黃素(分子量為564，分子式：C₂₉H₂₄O₁₂)是存在于黃茶、紅茶中的一種金黃色色素，是茶葉發酵的產物。目前，眾多研究表明，茶黃素具有降血脂、抵抗腫瘤發生發展，調節血糖，延緩衰老等多種生物學活性，并且其作用機制涉及廣泛，包括NF-κB、PI3K-Akt、AP-1等信號通路，具有多靶點、多環節、多效應等的作用特點，并且沒有毒副作用。然而對茶黃素抑菌作用的研究鮮有報道。

發明內容