[發(fā)明專利]多酚氧化酶及其編碼基因和應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202210022095.1
• 申請(qǐng)日: 2022-01-10
• 公開（公告）號(hào): CN114350628B
• 公開（公告）日: 2022-12-09
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 虞沂;曹應(yīng)龍;劉亞婷
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 湖北碳元本草生物科技有限公司
• 主分類號(hào): C12N9/02
• 分類號(hào): C12N9/02;C12N15/53;C12N15/70;C12N1/21;C12P19/44;C12R1/19
• 代理公司: 武漢藍(lán)寶石專利代理事務(wù)所(特殊普通合伙) 42242
• 代理人: 方菲

1.一種多酚氧化酶，其為序列如SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列組成的蛋白質(zhì)。

2.一種權(quán)利要求1所述的多酚氧化酶的編碼基因，其特征在于，基因?yàn)樾蛄腥鏢EQ IDNO.2所示的DNA分子。

3.一種包含權(quán)利要求2所述的多酚氧化酶的編碼基因的表達(dá)盒、重組載體或者重組菌。

4.一種重組大腸桿菌，其特征在于，包含權(quán)利要求2所述的多酚氧化酶的編碼基因。

5.權(quán)利要求1所述的多酚氧化酶在體外催化紅景天苷生成羥基紅景天苷或者體外催化肉蓯蓉新化合物生成毛蕊花苷的工藝中的應(yīng)用。

6.一種毛蕊花苷或羥基紅景天苷的體外合成方法，其特征在于，包括如下步驟：

向緩沖液中分別加入底物和權(quán)利要求1所述的多酚氧化酶，所述底物為肉蓯蓉新化合物或紅景天苷，得混合液；

將所述混合液置于25~35℃下反應(yīng)，再加入冰甲醇淬滅反應(yīng)。

7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的體外合成方法，其特征在于，所述緩沖液為pH 7~7.5的Tris-HCl緩沖液。

8.根據(jù)權(quán)利要求6所述的體外合成方法，其特征在于，所述混合液中還含有抗壞血酸、硫酸銅和/或SDS。

9.根據(jù)權(quán)利要求6~8任一項(xiàng)所述的體外合成方法，其特征在于，所述混合液中，所述底物和所述多酚氧化酶的濃度比1mM：5μM。