[發明專利]一種索烴化的VAR2CSA重組蛋白及其制備方法和應用

有效

• 申請號: 202210012869.2
• 申請日: 2022-01-07
• 公開（公告）號: CN114075298B
• 公開（公告）日: 2022-04-29
• 發明（設計）人: 胡文;陶鑄;郭文中;丁文婷;秦莉;陳小平
• 申請（專利權）人: 廣州中科藍華生物科技有限公司
• 主分類號: C07K19/00
• 分類號: C07K19/00;C12N15/62;C12N5/10;A61K39/00;A61P35/00;A61P35/02
• 代理公司: 北京品源專利代理有限公司 11332
• 代理人: 王艷齋

1.一種索烴化的VAR2CSA重組蛋白，其特征在于，所述索烴化的VAR2CSA重組蛋白包括結合域、SpyTag、p53dim domain和SpyCatcher；

所述結合域包括VAR2CSA蛋白中與胎盤樣硫酸軟骨素A結合的結構域；

所述索烴化的VAR2CSA重組蛋白的多肽序列為SEQ ID NO.8所示的序列。

2.一種權利要求1所述的索烴化的VAR2CSA重組蛋白的制備方法，其特征在于，所述制備方法包括：

構建含有權利要求1所述的索烴化的VAR2CSA重組蛋白的編碼基因的表達載體，將所述表達載體轉入細胞中，培養細胞并進行蛋白純化，得到所述索烴化的VAR2CSA重組蛋白。

3.一種核酸分子，其特征在于，所述核酸分子為權利要求1所述的索烴化的VAR2CSA重組蛋白的編碼基因；

所述索烴化的VAR2CSA重組蛋白的編碼基因為如SEQ ID NO.11所示的脫氧核糖核酸序列或與其具有至少80%以上核苷酸同一性的變體。

4.一種嵌合抗原受體細胞體系，其特征在于，所述嵌合抗原受體細胞體系包括權利要求1所述的索烴化的VAR2CSA重組蛋白和嵌合抗原受體細胞；

所述嵌合抗原受體細胞表達識別所述索烴化的VAR2CSA重組蛋白的嵌合抗原受體；

所述細胞為免疫效應細胞，所述免疫效應細胞包括T細胞、B細胞、NK細胞、樹突狀細胞或巨噬細胞中的任意一種或至少兩種的組合。

5.根據權利要求4所述的嵌合抗原受體細胞體系，其特征在于，所述嵌合抗原受體包括識別所述索烴化的VAR2CSA重組蛋白的結構域；

所述嵌合抗原受體還包括鉸鏈區、跨膜區和胞內共刺激信號區；

所述識別所述索烴化的VAR2CSA重組蛋白的結構域包含由重鏈可變區和輕鏈可變區組成的單鏈抗體；

編碼所述單鏈抗體重鏈可變區的基因為如SEQ ID NO.14所示的脫氧核糖核酸序列；

編碼所述單鏈抗體輕鏈可變區的基因為如SEQ ID NO.15所示的脫氧核糖核酸序列；

所述鉸鏈區為人CD8α鉸鏈區；

所述跨膜區為人CD28跨膜區；

所述胞內共刺激信號區為人CD27胞內信號區、人CD134胞內信號區、人CD28胞內信號區或人4-1BB胞內信號區中的任意一種或至少兩種的組合；

所述嵌合抗原受體的氨基末端含有一個CD8α信號肽；

所述嵌合抗原受體的羧基末端還包含一個人CD3ζ胞內信號區；

所述嵌合抗原受體包含從蛋白N-端到C-端依次串聯的CD8α信號肽、識別所述索烴化的VAR2CSA重組蛋白的單鏈抗體、人CD8α鉸鏈區、人CD28跨膜區、人CD28胞內信號區、人4-1BB胞內信號區和人CD3ζ胞內信號區；

所述嵌合抗原受體為如SEQ ID NO.16所示的多肽序列。

6.一種嵌合抗原受體細胞，其特征在于，所述嵌合抗原受體細胞表達識別權利要求1所述索烴化的VAR2CSA重組蛋白的嵌合抗原受體。

7.一種藥物組合物，其特征在于，所述藥物組合物包括如權利要求1所述的索烴化的VAR2CSA重組蛋白、如權利要求3所述的核酸分子、如權利要求4所述的嵌合抗原受體細胞體系或如權利要求6所述的嵌合抗原受體細胞中任意一種或至少兩種的組合；

所述藥物組合物還包括藥學上可接受的輔料。

8.如權利要求1所述的索烴化的VAR2CSA重組蛋白、如權利要求3所述的核酸分子、如權利要求4所述的嵌合抗原受體細胞體系、如權利要求6所述的嵌合抗原受體細胞或如權利要求7所述的藥物組合物在制備治療腫瘤的藥物中的應用；

所述腫瘤為表達胎盤樣硫酸軟骨素A的實體腫瘤和/或血液腫瘤。