[發明專利]一種多肽合成的氨基酸保護劑及DCC產物沉淀的制備方法

在審

• 申請號: 202210011506.7
• 申請日: 2022-01-06
• 公開（公告）號: CN114349815A
• 公開（公告）日: 2022-04-15
• 發明（設計）人: 柳春曦;柳光旭
• 申請（專利權）人: 柳春曦
• 主分類號: C07K1/06
• 分類號: C07K1/06;C07K1/02;C07K1/30
• 代理公司: 無錫風創知識產權代理事務所(特殊普通合伙) 32461
• 代理人: 駱莉

本發明公開了一種多肽合成的氨基酸保護劑及DCC產物沉淀的制備方法，取保護劑X，X為4?氨基苯磺酸鈉，取1mmol的保護劑溶于10ml水中，充分溶解，然后取丙氨酸1mmol反應，X氨基與丙氨酸羧基端結合形成酰胺鍵，在丙氨酸氨基端后依次接A、B、C、D、E等氨基酸，同時分別加入DCC碳二亞胺1mmol進行反應，反應2?2.5h，直到多肽鏈合成末尾為止，本發明中的保護劑方便且無毒無害，易于沉淀，X可結合丙氨酸羧基端，又可與沉淀劑結合而沉淀，非常實用，而DCC產物二環己脲用另外的沉淀劑沉淀，DCC反應產物二環己脲有少量溶于水中，用另外的沉淀劑酒石酸沉淀，比較便宜方便，且純度提取的效率較高，精度較高，易于合成純的多肽。

技術領域

本發明涉及多肽合成的相關技術領域，尤其涉及一種多肽合成的氨基酸保護劑及DCC產物沉淀的制備方法。

背景技術

目前多肽合成技術所用氨基酸保護劑的分子結構復雜，且污染比較大，不易于沉淀分離，急需一種分子簡單易于分離的氨基酸保護劑來滿足市場需求，而氨基酸鏈合成中加入了DCC催化劑，其產物二環己脲少一部分溶于水中，未能完全除去，缺少一種能除去水中溶解的二環亞胺的方法，來節省成本。本方案提供一種簡單易行的氨基酸保護劑引物和二環亞胺沉淀的技術。

發明內容

本發明的目的是為了解決現有的問題，而提出的一種多肽合成的氨基酸保護劑及DCC產物沉淀的制備方法。

為了實現上述目的，本發明采用了如下技術方案：

一種多肽合成的氨基酸保護劑的制備方法，包括以下步驟：

步驟一：取保護劑X，X為4-氨基苯磺酸鈉，取1mmol的保護劑溶于10ml水中，充分溶解，然后取丙氨酸1mmol反應，X氨基與丙氨酸羧基端結合形成酰胺鍵；

步驟二：在丙氨酸氨基端后依次接A、B、C、D、E等氨基酸，同時分別加入DCC碳二亞胺1mmol進行反應，反應2-2.5h，直到多肽鏈合成末尾為止；

步驟三：取1mmol的丙氨酸氨肽酶，用酶切下X-丙氨酸，然后加入沉淀劑氯化鈣進行反應，除去保護劑X分子上由苯磺酸基結合鈣離子沉淀形成的Ca²⁺－X－Ala-NH₂；

一種多肽合成的DCC產物沉淀的制備方法，包括以下步驟：

步驟一：加入了n個1mmol的碳二亞胺，催化產生了二環己脲沉淀，少量溶于水中未能完全除去；

步驟二：在步驟一的產物中加入酒石酸沉淀劑，通過反應沉淀除去二環己脲，通過過濾器過濾掉沉淀，濾出清液；

步驟三：利用烘干器干燥水分，從而得到純的多肽產物。

綜上所述，由于采用了上述技術方案，本發明的有益效果是：該發明中通過添加保護劑X的4－氨基苯磺酸鈉和丙氨酸，保護劑X與丙氨酸反應，由于保護劑X中含苯磺酸基與鈣離子結合，其氨基在丙氨酸羧基端中起封端作用，起引物作用引導連接丙氨酸，而丙氨酸在在DCC催化劑下結合多種氨基酸結合形成氨酰鍵，與A、B、C、D、E等氨基酸依次反應合成一條鏈條。用丙氨酸氨肽酶切離丙氨酸，保護劑X頭端與沉淀劑結合而沉淀；保護劑X價格較便宜，比其他保護劑方便且無毒無害，易于沉淀，X可結合丙氨酸羧基端，又可與沉淀劑結合而沉淀，非常實用，而DCC產物二環己脲用另外的沉淀劑沉淀，DCC反應產物二環己脲有少量溶于水中，用另外的沉淀劑酒石酸沉淀，比較便宜方便，且純度提取的效率較高，精度較高，易于合成純的多肽。

附圖說明

圖1為氨基酸多肽合成的化學分子式；

具體實施方式