[發明專利]一種靶向PD-L1多肽、制備方法，組裝形成的納米管及應用

有效

• 申請號: 202210011286.8
• 申請日: 2022-01-06
• 公開（公告）號: CN114507270B
• 公開（公告）日: 2023-07-14
• 發明（設計）人: 張黎民;王蔚芝
• 申請（專利權）人: 北京理工大學
• 主分類號: C07K7/06
• 分類號: C07K7/06;C07K1/04;C07K1/06;A61K47/42;A61P35/00
• 代理公司: 北京中索知識產權代理有限公司 11640
• 代理人: 唐亭

本發明公開了一種靶向PD?L1多肽、制備方法，組裝形成的納米管及應用，多肽通式如下：X1X2X3X4X5X6X7X8X9X10；其中X1、X2、X8、X9、X10為親水性氨基酸，X3為堿性或酸性氨基酸，X4、X5、X6、X7為疏水性氨基酸；多肽自組裝形成納米管，所述納米管可以作為腫瘤治療藥物或成像試劑載體，用于腫瘤的免疫聯合治療和成像；本發明得到的多肽自組裝形成納米管，可以將具有識別功能的殘基展示在納米管表面，顯示出特異性結合PD?L1。

技術領域

本發明涉及生物材料和醫藥技術領域，具體涉及一種靶向PD-L1多肽、制備方法，組裝形成的納米管及應用。

背景技術

惡性腫瘤嚴重危害人類健康，2020年全球新發癌癥1929萬例，死亡近1000萬例。近年來，隨著生物材料和免疫學等領域的快速發展，腫瘤免疫診療已獲得了極大的突破。與傳統的化療、放療以及手術療法不同，腫瘤免疫療法通過激活人體自身的免疫系統來殺死腫瘤細胞，具有持久性、全身性、針對性和安全性等諸多優點，被譽為癌癥治療的第三次革命，也被認為是攻克腫瘤的新希望。

腫瘤免疫療法主要包括腫瘤疫苗、過繼性免疫細胞療法以及免疫檢查點療法；其中免疫檢查點療法是人們關注的熱點。免疫檢查點是一類免疫抑制性的分子可以降低免疫反應的強度，避免過度免疫防止對正常組織造成損傷和破壞。然而癌癥發展過程中也巧妙的利用了這一機制，在腫瘤細胞表面表達免疫檢查點分子，從而造成免疫逃逸。免疫檢查點療法是通過使用抑制劑分子與免疫檢查點結合從而阻斷腫瘤細胞與免疫細胞結合從而激活免疫來殺死腫瘤細胞的過程。目前已經發現了多個免疫檢查點，如細胞毒性T細胞相關蛋白-4(CTLA-4)、程序性死亡受體(PD-1)及其配體1(PD-L1)、T細胞免疫球蛋白和ITIM結構域蛋白(TIGIT)等。該療法發展至今已有多種抑制劑藥物上市或進入臨床階段并取得了令人滿意的效果。如針對CTLA-4檢查點的ipilimumab和tremelimumab，以及作為PD-1抑制劑的pembrolizumab和nivolumab等。

目前免疫檢查點抑制劑絕大多數以抗體為主，抗體具有抑制效率高，能夠顯著延長腫瘤患者生存期等優點，但其固有的免疫原性，穿透力弱、副作用大，熱穩定性低，以及制備復雜，價格昂貴等缺陷限制了其發展。

由于PD-L1參與了腫瘤的發生、發展過程，并協助腫瘤細胞逃避機體免疫系統的殺傷。與常規的靶蛋白不同，PD-L1由于其結合位點特殊，一直是抑制劑開發的難點。多肽憑借其生物相容性好、免疫原性低、易排泄清除、可化學合成等優勢，在基于分子識別的免疫抑制劑研發中具有舉足輕重的作用。此外，不同的氨基酸具有獨特的理化性質，如帶電性、親疏水性以及手性等。這些不同性質的氨基酸分子之間通過脫水縮合形成多肽過程中按照排列順序以及殘基個數的不同，可產生蘊含豐富結構信息和識別信息的多肽鏈，這是其他分子所無法匹及的。并且多肽憑借其優勢在腫瘤免疫、診斷等方面彰顯出很強的優越性。小分子靶向多肽在體內動態環境中存在與靶點單價結合，不穩定，易被酶降解的困境，而多肽經過設計可通過自組裝形成超分子納米結構，如納米管，納米纖維和納米球等。這些納米組裝體的形成一方面大大增加了其抗酶解性能，另一方面可作為載體高效運載抗腫瘤藥物及成像試劑到達腫瘤位點實現多種方法聯合診療。然而，在基于β-折疊二級結構的多肽自組裝過程中，為了形成穩定的自組裝結構，多肽分子都會以垂直于組裝體表面的方式進行排布，導致側鏈活性位點完全掩埋在組裝體中，無法建立結構-功能上的聯系。為使組裝體具有靶向功能，目前常用的方法是將具有識別功能的多肽單元和具有組裝功能的單元拼接，這種方式一定程度上實現了組裝和識別，但存在單元間無法協調的問題；另一種方式是采用共組裝的方式，將識別序列設計的比組裝序列更長，使得共組裝后識別序列暴露在組裝體外部，但該方法需嚴格調控兩種多肽的組裝密度。

發明內容

本發明針對現有技術存在的問題提供一種對PD-L1具有高親和力、自組裝形成的納米管將具有識別功能的殘基展示在納米管表面的靶向PD-L1多肽、制備方法，組裝形成的納米管及應用。

本發明采用的技術方案是：