[發明專利]一種用于構建游離DNA文庫的試劑及其應用有效
| 申請號： | 202210010826.0 | 申請日： | 2022-01-06 |
| 公開（公告）號： | CN114032619B | 公開（公告）日： | 2022-05-20 |
| 發明（設計）人： | 許瑞霞;楊祖;郭慶凱;王瑩瑩;楊玉妍;孔令印;梁波 | 申請（專利權）人： | 蘇州貝康醫療器械有限公司 |
| 主分類號： | C40B50/06 | 分類號： | C40B50/06;C12Q1/6806 |
| 代理公司： | 北京品源專利代理有限公司 11332 | 代理人： | 趙穎 |
| 地址： | 215000 江蘇省蘇州市蘇州市工*** | 國省代碼： | 江蘇;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 用于 構建 游離 dna 文庫 試劑 及其 應用 | ||
【權利要求書】：
1.一種構建游離DNA文庫的方法，其特征在于，所述方法包括以下步驟：
（1）使用熱敏性蛋白酶處理樣本；
（2）向步驟（1）處理后樣本中加入載體DNA和末端修復試劑，進行末端修復加dA尾；
（3）向步驟（2）加dA尾產物中加入接頭和接頭連接試劑，進行接頭連接；
（4）向步驟（3）連接產物中加入純化試劑，進行連接產物純化；
（5）向步驟（4）純化產物中加入載體DNA降解劑，進行孵育，所述載體DNA降解劑包括尿嘧啶DNA糖基化酶；
（6）以步驟（5）產物為模板進行PCR擴增并純化擴增產物，構建所述游離DNA文庫；
所述接頭連接試劑包括T4 DNA連接酶、T4 DNA連接緩沖液、丙二醇和聚乙二醇-6000；
所述載體DNA的核酸序列為SEQ ID NO.1所示的序列；
步驟（1）所述樣本為廢棄胚胎培養液。
2.根據權利要求1所述的構建游離DNA文庫的方法，其特征在于，所述方法還包括制備載體DNA的步驟；
所述載體DNA的制備方法包括：通過基因合成制備所述載體DNA。
3.一種以非疾病診斷和/或治療為目的的檢測游離DNA的方法，其特征在于，所述方法包括：
利用權利要求1或2所述的構建游離DNA文庫的方法構建樣本的游離DNA文庫，對所述游離DNA文庫進行檢測分析。
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