[發明專利]一種鑒別雜色鮑遺傳性別的分子標記及其應用

有效

• 申請號: 202210010619.5
• 申請日: 2022-01-05
• 公開（公告）號: CN114231608B
• 公開（公告）日: 2023-06-20
• 發明（設計）人: 蔡明夷;翁曉霞;徐楊如
• 申請（專利權）人: 集美大學
• 主分類號: C12Q1/6879
• 分類號: C12Q1/6879;C12Q1/6888;C12Q1/6858;C12N15/11
• 代理公司: 廈門市精誠新創知識產權代理有限公司 35218
• 代理人: 秦華

本發明公開了一種鑒別雜色鮑遺傳性別的分子標記及其應用。所述分子標記表現為分子標記表現為SEQ?ID?NO:1所示核苷酸序列的插入/缺失長度多態性。雜色鮑個體的一對同源染色體的其中一條缺失SEQ?ID?NO:1核苷酸序列，遺傳性別為雄性；雜色鮑個體的一對同源染色體均沒有缺失SEQ?ID?NO:1核苷酸序列，遺傳性別為雌性。檢測時，采用SEQ?ID?NO:2和3為引物進行PCR擴增，當所述擴增產物為2個片段，長度分別266bp和243bp，所述待測雜色鮑的遺傳性別為雄性；當所述擴增產物只有1個片段，長度為266bp，所述待測雜色鮑的遺傳性別為雌性。雜色鮑性腺分化前后均適用于該方法。

技術領域

本發明涉及水產生物技術領域中的貝類遺傳性別鑒定和性別控制技術，尤其涉及一種鑒定雜色鮑遺傳性別的分子標記及其應用。

背景技術

水產生物的性別可以由遺傳決定也可以由環境因素決定。即使遺傳決定性別的物種，也易發生性逆轉。因此，遺傳決定性別水產生物的性別包括遺傳性別和生理性別兩個層面。遺傳性別即決定性別方向的遺傳組成，生理性別即性腺等實際表現的性別。在水產養殖和性別控制育種中，常常存在研究對象遺傳性別與生理性別不一致的情況，需要鑒定研究對象的遺傳性別。

水產生物的經濟性狀常常具有性別二態性。因此，通過性別控制技術生產單性或不育苗種在水產養殖中具有良好的應用前景。水產生物性別控制育種過程中，需要通過人工誘導培育性反轉個體(生理性別與遺傳性別相反)、超雄個體(雄性異配，YY)或超雌個體(雌性異配，WW)。鑒定這些個體的遺傳性別是性別控制育種的一個必要的環節。在沒有性別分子標記的情況下，一般用后裔測定法進行鑒定。但后裔測定法存在周期長、成本高的缺點。性別分子標記是指與性別緊密連鎖的DNA標記。性別分子標記可以通過PCR進行檢測，進而根據PCR檢測結果確定生物體的遺傳性別。與后裔測定法相比較，基于性別分子標記的PCR檢測鑒定水產動物的遺傳性別具有簡便、快速和經濟等優勢。目前，性別分子標記已在多種水產動物中開發成功，并應用于性別控制育種，極大地提高了性別控制育種效率，縮短了育種周期。但由于性別標記在物種間通常不能通用，特定物種的性別分子標記需要專門開發。

雜色鮑(Haliotis?diversicolor)屬原始腹足目、鮑科、鮑屬，是一種重要海水養殖對象。由于雄性的成活率和品質較高，因此雜色鮑性別控制相關技術具有潛在的商業應用價值。性別分子標記是性別控制育種的重要工具。然而，迄今，雜色鮑的性別分子標記在國內外均未見報道。

發明內容

本發明的目的在于提供一種鑒別雜色鮑遺傳性別的分子標記。

為實現上述目的，本發明提供一種雜色鮑遺傳性別相關的分子標記，其特征在于，所述分子標記表現為核苷酸序列SEQ?ID?NO:1所示核苷酸序列的插入/缺失長度多態性；雜色鮑個體的一對同源染色體的其中之一缺失了SEQ?ID?NO:1所示核苷酸序列的，遺傳性別為雄性；雜色鮑個體的一對同源染色體均沒有缺失SEQ?ID?NO:1所示核苷酸序列，遺傳性別為雌性。

本發明還提供一種用于檢測所述遺傳性別分子標記的引物對，其特征在于：所述引物具有SEQ?ID?NO:2-3所示的核苷酸序列。

本發明還提供一種用于檢測所述分子標記的試劑盒，其特征在于，含有所述引物對。

本發明還保護所述分子標記或所述引物對或所述試劑盒在雜色鮑育種和育苗中的用途。

本發明還提供一種鑒別雜色鮑遺傳性別的方法，其特征在于，對待測雜色鮑進行權利要求1所述分子標記的檢測，以確定所述待測雜色鮑的遺傳性別。

進一步，所述的方法包括：

利用權利要求2所述引物對或權利要求3所述試劑盒，對待測雜色鮑DNA進行PCR擴增；檢測擴增片段的數目及長度，以及

基于所述擴增片段的數目和長度，確定雜色鮑的遺傳性別，