[發明專利]卵細胞特異表達基因ECS制備被子植物單倍體的方法及應用

在審

• 申請號: 202210009291.5
• 申請日: 2022-01-06
• 公開（公告）號: CN114350701A
• 公開（公告）日: 2022-04-15
• 發明（設計）人: 孫蒙祥;張雪成;史冊
• 申請（專利權）人: 武漢大學
• 主分類號: C12N15/82
• 分類號: C12N15/82;C12N15/57;A01H5/00;A01H6/20
• 代理公司: 武漢科皓知識產權代理事務所(特殊普通合伙) 42222
• 代理人: 張火春

1.卵細胞特異表達基因ECS制備被子植物單倍體的方法，該方法包括下列步驟：(1)獲取卵細胞特異表達基因型ECS突變/沉默種子；(2)基因型ECS突變/沉默自花授粉獲得純合的突變/沉默種子；(3)直接篩選獲得母本的被子植物單倍體誘導系。

2.權利要求1中卵細胞特異表達基因ECS制備被子植物單倍體的方法，該方法包括下列步驟：(1)以基因工程方式獲取突變/沉默卵細胞特異表達ecs基因的表達下調低于50％的純合種子，(2)基因型ECS突變/沉默自花授粉獲得純合的突變/沉默種子；(3)通過植株表型觀察，流式細胞儀檢測倍性及減數分裂時期染色體展示鑒定染色體數目篩選獲得母本的被子植物單倍體誘導系；其中，基因工程獲取ECS表達下調低于50％的純合種子的方式包括但不限于T-DNA插入突變、CRISPPR/Cas9敲除、RNAi干擾、鋅指核酸酶(FZN)、轉錄激活子樣效應因子核酸酶(TALEN)。

3.權利要求2中卵細胞特異表達基因ECS制備擬南芥單倍體的方法，該方法包括下列步驟：(1)卵細胞特異表達基因型ecs1和ecs2基因型突變體為T-DNA插入突變，獲取基因型ecs1 ecs2雙突變種子；(2)基因型ecs1 ecs2自花授粉獲得純合的雙突變種子；(3)通過植株表型觀察，流式細胞儀檢測倍性及減數分裂時期染色體展示鑒定染色體數目篩選獲得母本的擬南芥單倍體單倍體誘導系。

4.卵細胞特異表達基因ECS制備被子植物單倍體的方法在制備被子植物單倍體制備中的應用。

5.卵細胞特異表達基因ECS制備被子植物單倍體的方法在制備擬南芥單倍體中的應用。