[發明專利]α-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶的突變體

在審

• 申請號: 202180051073.1
• 申請日: 2021-08-27
• 公開（公告）號: CN116234901A
• 公開（公告）日: 2023-06-06
• 發明（設計）人: 高橋健一;久保田紗希;F·N·佐洛塔寥夫
• 申請（專利權）人: JCR制藥股份有限公司
• 主分類號: C12N5/10
• 分類號: C12N5/10
• 代理公司: 中原信達知識產權代理有限責任公司 11219
• 代理人: 魯雯雯;金龍河

1.一種選自由下述(1)～(7)組成的組中的人α-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶(hNAGLU)的突變體：

(1)含有在序列號1所示的野生型的hNAGLU的氨基酸序列中第36位的賴氨酸被置換為谷氨酸且第37位的脯氨酸被置換為絲氨酸而得到的序列號3所示的氨基酸序列的hNAGLU突變體；

(2)含有在序列號1所示的野生型的hNAGLU的氨基酸序列中第44位的亮氨酸與第45位的甘氨酸之間添加了絲氨酸而得到的序列號5所示的氨基酸序列的hNAGLU突變體；

(3)含有在序列號1所示的野生型的hNAGLU的氨基酸序列中第209位的谷氨酰胺被置換為精氨酸而得到的序列號9所示的氨基酸序列的hNAGLU突變體；

(4)含有在序列號1所示的野生型的hNAGLU的氨基酸序列中第228位的谷氨酸被置換為賴氨酸而得到的序列號11所示的氨基酸序列的hNAGLU突變體；

(5)含有在序列號1所示的野生型的hNAGLU的氨基酸序列中第320位的蘇氨酸被置換為脯氨酸且第321位的谷氨酸被置換為天冬氨酸而得到的序列號15所示的氨基酸序列的hNAGLU突變體；

(6)含有在序列號1所示的野生型的hNAGLU的氨基酸序列中第505位的絲氨酸被置換為丙氨酸且第506位的異亮氨酸被置換為纈氨酸而得到的序列號17所示的氨基酸序列的hNAGLU突變體；以及

(7)含有在序列號1所示的野生型的hNAGLU的氨基酸序列中第526位的絲氨酸被置換為天冬酰胺且第528位的丙氨酸被置換為蘇氨酸而得到的序列號19所示的氨基酸序列的hNAGLU突變體。

2.一種hNAGLU突變體，其相對于權利要求1所述的含有序列號3所示的氨基酸序列的hNAGLU突變體，在該氨基酸序列的第36位的谷氨酸和第37位的絲氨酸以外含有選自由以下的(1’-a)～(1’-h)組成的組中的突變：

(1’-a)構成該氨基酸序列的氨基酸殘基被其它氨基酸殘基置換，該被置換的氨基酸殘基的個數為1～10個、1～5個或1～3個，例如為1個或2個；

(1’-b)構成該氨基酸序列的氨基酸殘基發生了缺失，該缺失的氨基酸殘基的個數為1～10個、1～5個或1～3個，例如為1個或2個；

(1’-c)組合了所述1’-a的置換和1’-b的缺失；

(1’-d)在該氨基酸序列中或者在該氨基酸序列的N末端側或C末端側添加了1個或2個以上氨基酸殘基，該添加的氨基酸殘基的個數為1～10個、1～5個或1～3個，例如為1個或2個；

(1’-e)組合了所述1’-a的置換和1’-d的添加；

(1’-f)組合了所述1’-b的缺失和1’-d的添加；

(1’-g)組合了所述1’-a的置換、1’-b的缺失和1’-d的添加；以及

(1’-h)與該氨基酸序列顯示80％以上、85％以上、90％以上、95％以上的一致性、98％以上或99％的一致性。

3.一種hNAGLU突變體，其相對于權利要求1所述的含有序列號5所示的氨基酸序列的hNAGLU突變體，在該氨基酸序列的第45位的絲氨酸以外具有選自由以下的(2’-a)～(2’-h)組成的組中的突變：

(2’-a)構成該氨基酸序列的氨基酸殘基被其它氨基酸殘基置換，該被置換的氨基酸殘基的個數為1～10個、1～5個或1～3個，例如為1個或2個；

(2’-b)構成該氨基酸序列的氨基酸殘基發生了缺失，該缺失的氨基酸殘基的個數為1～10個、1～5個或1～3個，例如為1個或2個；

(2’-c)組合了所述2’-a的置換和2’-b的缺失；

(2’-d)在該氨基酸序列中或者在該氨基酸序列的N末端側或C末端側添加了1個或2個以上氨基酸殘基，該添加的氨基酸殘基的個數為1～10個、1～5個或1～3個，例如為1個或2個；

(2’-e)組合了所述2’-a的置換和2’-d的添加；

(2’-f)組合了所述2’-b的缺失和2’-d的添加；

(2’-g)組合了所述2’-a的置換、2’-b的缺失和2’-d的添加；以及

(2’-h)與該氨基酸序列顯示80％以上、85％以上、90％以上、95％以上的一致性、98％以上或99％的一致性。