[發(fā)明專利]結(jié)合α-突觸核蛋白原纖維的抗體

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 202180041047.0
• 申請日: 2021-06-25
• 公開（公告）號: CN115803341A
• 公開（公告）日: 2023-03-14
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 伊娃·諾德斯特龍;杰西卡·西格瓦爾德森;帕特里克·尼格倫
• 申請（專利權(quán)）人: 生命北極公司
• 主分類號: C07K16/18
• 分類號: C07K16/18;A61P25/00
• 代理公司: 北京安信方達(dá)知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11262
• 代理人: 徐愛文;張奎燕

本披露內(nèi)容部分地基于發(fā)現(xiàn)選擇性靶向比如寡聚物/原纖維等人α?突觸核蛋白聚集體的抗體，比如BAN0805。與小鼠單克隆抗體mAb47相比，BAN0805與不期望的單體α?突觸核蛋白靶標(biāo)結(jié)合的傾向較低。

相關(guān)申請的交叉引用

本申請要求于2020年6月26日提交的美國臨時(shí)申請?zhí)?3/044881和2020年8月27日提交的美國臨時(shí)申請?zhí)?3/071150的權(quán)益，這些臨時(shí)申請各自的全部內(nèi)容通過援引并入本文。

參考序列表

名稱為Sequence_Listing_AVR-71925_ST25.txt、包含SEQ ID NO：1至SEQ ID NO：20的序列表的全部內(nèi)容通過援引并入本文，該序列表包括本文所披露的核酸和氨基酸序列。該序列表已通過EFS以ASCII文本格式以電子方式提交。該序列表于2021年6月17日首次創(chuàng)建，并且大小為18,417個(gè)字節(jié)。

背景技術(shù)

國際專利申請?zhí)朩O 2011/104696 A1(其通過援引并入本文)披露了一種與α-突觸核蛋白的原纖維(protofibril)形式結(jié)合的鼠單克隆IgG抗體mAb47。仍然需要適用于人類的與α-突觸核蛋白的原纖維形式選擇性結(jié)合的抗體。

發(fā)明內(nèi)容

本披露內(nèi)容涉及對人α-突觸核蛋白原纖維具有高親和力并且對α-突觸核蛋白單體具有低親和力的抗體。在一些實(shí)施方案中，本文所述的抗體選擇性靶向比如寡聚物/原纖維等人α-突觸核蛋白聚集體，即，與單體相比，與α-突觸核蛋白原纖維的結(jié)合要強(qiáng)得多。在一些實(shí)施方案中，當(dāng)比較α-突觸核蛋白原纖維相對于單體的結(jié)合比時(shí)，本文所述的抗體具有比mAb47更好的選擇性。在一些實(shí)施方案中，本文所述的抗體為抗α-突觸核蛋白抗體。

在一個(gè)方面，本披露內(nèi)容涉及BAN0805，即一種單克隆抗體，其包含含有SEQ IDNO：3所示的氨基酸序列的重鏈和含有SEQ ID NO：4所示的氨基酸序列的輕鏈；該單克隆抗體選擇性靶向比如寡聚物/原纖維等人α-突觸核蛋白聚集體，對人α-突觸核蛋白原纖維具有高親和力并且對α-突觸核蛋白單體具有低親和力。有趣的是，BAN0805相比于mAb47還表現(xiàn)出較低的α-突觸核蛋白單體結(jié)合，使得當(dāng)比較α-突觸核蛋白原纖維相對于單體的結(jié)合比時(shí)，BAN0805比mAb47的選擇性更好。此外，未檢測到BAN0805與β-突觸核蛋白單體和γ-突觸核蛋白單體或Aβ-原纖維的結(jié)合。

本披露內(nèi)容進(jìn)一步涉及用于在治療具有α-突觸核蛋白病狀的神經(jīng)退行性疾病方面進(jìn)行改善的抗體，這些神經(jīng)退行性疾病包括但不限于帕金森病(PD)。

附圖說明

專利或申請文件包含至少一幅彩色附圖。在提出請求并支付必要的費(fèi)用后，專利局將提供帶有一幅或多幅彩圖的本專利或?qū)＠暾埞嫉母北尽?/p>

圖1示出BAN0805的熱應(yīng)激數(shù)據(jù)。將1mg/mL純化候選抗體的樣品暴露于a)4℃、b)25℃、c)37℃和d)50℃的溫度持續(xù)兩周。然后通過SEC-MALS分析了樣品以檢查聚集情況。數(shù)據(jù)表明，BAN0805不存在由熱應(yīng)激引起的聚集問題。

圖2示出BAN0805在與α-突觸核蛋白單體和原纖維(PF)結(jié)合時(shí)進(jìn)行的抑制ELISA，以IC₅₀值表示。與僅具有340倍選擇性的mAb47相比(未示出)，BAN0805對α-突觸核蛋白的原纖維形式具有910倍的更好的選擇性。原纖維水平在濃度方面表示為與單體水平相當(dāng)，并且不考慮原纖維的大小。通過將單體結(jié)合的IC₅₀值與PF結(jié)合的IC₅₀值相除來計(jì)算倍數(shù)選擇性。