[發明專利]用于多路復用測定的被動光學條形碼化的組合物和方法

在審

• 申請號: 202180032461.5
• 申請日: 2021-05-04
• 公開（公告）號: CN115485556A
• 公開（公告）日: 2022-12-16
• 發明（設計）人: J·金姆;A·T·阮;B·米勒
• 申請（專利權）人: 彈弓生物科學公司
• 主分類號: G01N33/543
• 分類號: G01N33/543;G01N33/544;G01N33/545;G01N33/548
• 代理公司: 北京坤瑞律師事務所 11494
• 代理人: 封新琴

本發明提供組合物，其包含具有基本上相等的直徑的多個水凝膠顆粒，但是來自所述多個水凝膠顆粒的每個子分組的顆粒具有一種或多種被動光學特性的不同相關值，所述水凝膠顆粒可以使用細胞計數儀表解卷積。來自所述多個水凝膠顆粒的每個水凝膠顆粒可以用來自靶標集的不同生化或化學靶標官能化。一種制備水凝膠顆粒的方法包括形成液滴以及使所述液滴聚合，任選地進行官能化。

相關申請的交叉引用

本申請要求2020年5月4日提交且標題為“用于多路復用測定的被動光學條形碼化的組合物和方法(Compositions and Methods for Passive Optical Barcoding forMultiplexed Assays)”的美國臨時專利申請號63/019,478的優先權和權益，其公開內容通過引用以其整體并入本文。

技術領域

本公開文本涉及通過將水凝膠聚合物的被動光學特性工程化來使珠光學條形碼化，以及其用途。

背景技術

流式細胞術和高通量細胞計數分析(例如，高內涵成像)是允許對單獨細胞進行快速分離、計數和表征的技術，并且通常在多種應用的臨床和實驗室環境中使用。細胞計數裝置是本領域中已知的，并且包括用于進行流式細胞術和FACS、血液學分析以及高內涵成像的市售裝置。

發明內容

在一些實施方案中，組合物包含具有被動光學特性(例如，FSC和/或SSC)的水凝膠顆粒，所述水凝膠顆粒在不改變顆粒本身的大小(例如，直徑)的情況下被故意工程化或“調節”。然后可以將工程化的水凝膠用于多路復用，其使用被動光學特性，任選地與一種或多種另外的特性如熒光組合，以進行單一反應中的多路復用測定(例如，化學或生化)，所述單一反應可以基于單獨珠群體的被動光學特性進行解卷積。

在一些實施方案中，用于產生水凝膠顆粒的方法包括形成液滴和使液滴聚合，任選地進行官能化。所述方法得到如下水凝膠顆粒，所述水凝膠顆粒具有基本上相等的直徑，但具有不同的相關預定光學特性(例如，被動光學特性)，其可以使用細胞計數儀表來解卷積。

在一些實施方案中，提供一種方法用于多路復用測定。所述方法包括在單一測定中使用具有獨特被動光學特性的多個水凝膠顆粒的群體。來自所述多個水凝膠顆粒的每個水凝膠顆粒具有獨特相關的一個或多個生化靶標。對多個水凝膠顆粒的所述群體進行測定，并且基于其被動光學特性來分離所述水凝膠顆粒和/或所述生化靶標。然后基于所述被動光學特性來確定多路復用測定的結果。本文所述方法允許在單一反應中進行高維(1)多路復用測定，例如使用高通量細胞計數測量來進行。

附圖說明

應理解，圖式主要用于說明性目的，并且不打算限制本文所述的主題的范圍。

圖1是顯示根據一些實施方案，用于制備水凝膠顆粒的方法的流程圖。

圖2是顯示根據一些實施方案，用于進行生化多路復用的方法的流程圖。

圖3A是說明根據一些實施方案，細胞和所公開的水凝膠顆粒(A)的光學特性的簡圖。

圖3B是說明聚苯乙烯珠(B、C)的光學特性的簡圖。

圖4是顯示根據一些實施方案，可以被調諧以編碼特定前向和側向散射“條形碼”的變量的簡圖。

圖5是顯示根據一些實施方案，微流體通道中的顆粒形成的簡圖。

圖6是顯示根據一些實施方案，用于產生大小類似的珠的群體的編碼方案的簡圖，所述群體可以使用被動光學特性進行多路分用。

圖7A-圖7B是顯示大小相同的顆粒可以基于光學散射特性進行解卷積的圖。相比之下，僅基于熒光或生化靶標無法區分這些顆粒。該圖顯示了根據一些實施方案，使用被動光學特性作為主要解卷積變量進行生化多路復用和多路分用的能力。