[發明專利]可控樣品引入

在審

• 申請號: 202180031329.2
• 申請日: 2021-02-26
• 公開（公告）號: CN115427127A
• 公開（公告）日: 2022-12-02
• 發明（設計）人: M·R·杰克遜;J·A·伯內特
• 申請（專利權）人: 沃特世科技公司
• 主分類號: B01D15/14
• 分類號: B01D15/14;B01D15/16;G01N30/16;G01N30/24;G01N30/34;G01N30/20
• 代理公司: 中國專利代理(香港)有限公司 72001
• 代理人: 劉書航;呂傳奇

一種將樣品進樣到液相色譜系統的流中的方法包括：提供流動相的流；以及將一定體積的樣品進樣到所述流動相的所述流中，使得所述流動相內的所述樣品的濃度在所述進樣的過程中以三角形分布變化。

相關申請

本申請要求2020年2月28日提交的且名稱為“Controllable Sample DiluationAt Injector”的美國臨時專利申請序列號62/982,836的較早前提交日期的權益，該申請的全部內容以引用方式并入本文。

技術領域

本發明整體涉及液相色譜系統。更具體地，本發明涉及用于在液相色譜系統中控制樣品進樣的系統和方法。

背景技術

對于在許多科學領域應用的測試和分析協議都需要純化的化合物。化合物的純化涉及將期望的一種或多種組分與含有附加組分或雜質的混合物分離。可以應用色譜方法以將混合物分餾成單獨的組分。在液相色譜中，將包含多種待分離組分的樣品進樣到系統流中并引導通過色譜柱。柱通過差異保留將混合物分離成其單獨的組分。組分作為按時間分離的不同帶從柱洗脫。

典型的高效液相色譜（HPLC）系統包括用于以受控流量和組成遞送流體（“流動相”）的泵、將樣品溶液引入到流動的流動相中的注射器、包含填充材料或吸附劑（“固定相”）的色譜柱、以及檢測流動相中離開柱的樣品組分的存在和量的檢測器。當流動相通過固定相時，樣品中的每種組分通常在不同時間從柱中涌出，因為樣品中的不同組分通常對填充材料具有不同的親和力。可通過測量洗脫液的物理或化學性質的變化來檢測流動相中離開柱的特定組分的存在。通過將檢測器信號繪制為時間的函數，可以觀察到與樣品組分的存在和量相對應的響應“峰”。

制備型HPLC是分離和純化一定量化合物以供進一步研究或使用的便捷方法。根據具體應用，可以使用大型柱和樣品尺寸來執行制備型分離，或者可以使用小型柱來執行以用于較小體積的組分收集。制備型HPLC與分析型HPLC之間的常見區別在于，對于制備型HPLC，在純化后收集樣品組分，而對于分析型HPLC，簡單地對樣品組分進行檢測和定量。

由于大體積的樣品稀釋會改變色譜柱中存在的液體的洗脫特性，因此將大量樣品進樣到色譜系統中干擾了色譜分離。用流動相稀釋大量樣品進樣減少或消除了這些干擾。然而，稀釋使檢測器在色譜柱下游檢測到的峰形扭曲。

發明內容

在一個實施方案中，一種用于將樣品進樣到液相色譜系統的流中的方法包括：提供流動相的流；以及將一定體積的樣品進樣到所述流動相的所述流中，使得所述流動相內的所述樣品的濃度在所述進樣過程中以三角形分布變化。

此外或另選地，將所述一定體積的樣品進樣到所述流動相的所述流中在整個進樣序列中變化，而無需在所述整個進樣序列期間一直保持恒定的樣品流量。

此外或另選地，所述方法還包括：通過以變化的濃度將所述一定體積的樣品進樣來影響來自檢測器的合成峰形輸出，以增加由所述檢測器輸出的峰振幅或減小峰寬度。

此外或另選地，體積為至少100μL。

此外或另選地，將所述一定體積的樣品進樣到所述流動相的所述流中包括增加所述樣品的所述流，并且然后立即減少所述樣品的所述流，以形成所述樣品的三角形速度分布。

此外或另選地，將所述一定體積的樣品進樣到所述流動相的所述流中包括隨時間推移以恒定加速度的流量增加所述樣品的所述流并且隨時間推移以恒定減速度的流量減少所述樣品的所述流。

此外或另選地，將所述一定體積的樣品進樣到所述流動相的所述流中包括隨時間推移以變化加速度的流量增加所述樣品的所述流并且隨時間推移以變化減速度的流量減少所述樣品的所述流。