[發明專利]新DAHP合酶變體及使用其生產L-賴氨酸的方法

有效

• 申請號: 202180006181.7
• 申請日: 2021-04-02
• 公開（公告）號: CN114729340B
• 公開（公告）日: 2023-06-23
• 發明（設計）人: 樸暠夽;金柄秀;李翰衡;裵賢原;卞效情;許蘭;柳慧連;金斐那;孫晟光
• 申請（專利權）人: CJ第一制糖株式會社
• 主分類號: C12N9/10
• 分類號: C12N9/10;C12N15/54;C12N1/21;C12P13/08;C12R1/15
• 代理公司: 北京銀龍知識產權代理有限公司 11243
• 代理人: 鐘海勝;宋琴芝

本公開涉及一種新DAHP合酶(3?脫氧?D?阿拉伯庚酮糖酸?7?磷酸合酶)變體、包含所述變體的谷氨酸棒狀桿菌(Corynebacterium?glutamicum)菌株以及使用所述菌株生產L?賴氨酸的方法。

技術領域

本公開涉及一種新DAHP合酶變體、包含所述變體的谷氨酸棒狀桿菌(Corynebacterium?glutamicum)菌株以及使用所述菌株生產L-賴氨酸的方法。

背景技術

正在進行多種研究以開發出用于生產L-氨基酸和其他有用物質的高效微生物和發酵工藝技術。例如，主要使用目標物質特異性方法，在所述方法中編碼參與L-賴氨酸生物合成的酶的基因的表達增加，或在所述方法中除去了生物合成不需要的基因(WO2008-082181A1)。

但是，隨著對L-賴氨酸的需求增加，仍然需要進行研究以有效增加L-賴氨酸生產能力。

發明內容

技術問題

本公開的一個目的為提供一種DAHP合酶(3-脫氧-D-阿拉伯庚酮糖酸-7-磷酸合酶(3-deoxy-D-arabinoheptulosonate-7-phosphate?synthase))變體，其由SEQ?ID?NO:1表示的氨基酸序列組成，其中作為對應于SEQ?ID?NO:3的氨基酸序列的第382位的氨基酸的甘氨酸(Gly或G)被半胱氨酸(Cys或C)取代。

本公開的另一個目的為提供一種編碼本公開的變體的多核苷酸。

本公開的又另一個目的為提供一種谷氨酸棒狀桿菌(Corynebacteriumglutamicum)菌株，其包含本公開的變體或編碼所述變體的多核苷酸并且具有L-賴氨酸生產能力。

本公開的又另一個目的為提供一種用于生產L-賴氨酸的方法，其包括在培養基中培養包含本公開的變體或編碼所述變體的多核苷酸并且具有L-賴氨酸生產能力的谷氨酸棒狀桿菌菌株的步驟。

解決問題方法

將如下詳細地描述本公開。同時，本公開中所公開的每個描述和實施方式均可應用于其他描述和實施方式。換句話講，本公開中所公開的各種要素的所有組合均屬于本公開的范圍。此外，不可以認為本公開的范圍受到以下所述的具體描述的限制。此外，在本說明書通篇，引用了許多論文和專利文件并指出了其引用文件。所引用的論文和專利文件中所公開的全部內容以引用的方式并入本說明書中，以更清楚地描述本發明所屬的技術領域的水平和本發明的內容。

本公開的一個方面提供了一種變體，其由SEQ?ID?NO:1表示的氨基酸序列組成，其中作為對應于SEQ?ID?NO:3的氨基酸序列的第382位的氨基酸的甘氨酸(Gly或G)被半胱氨酸(Cys或C)取代。

本公開的變體可具有由SEQ?ID?NO:1表示的氨基酸序列，包含所述氨基酸序列或基本上由所述氨基酸序列組成。

在本公開的變體中，在由上述SEQ?ID?NO:1表示的氨基酸序列中對應于基于SEQID?NO:3的氨基酸序列的第382位的氨基酸為半胱氨酸，并且該變體可包含與由SEQ?ID?NO:1表示的氨基酸序列具有至少70％、75％、80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％、99％、99.5％、99.7％或99.9％或更高的同源性或同一性的氨基酸序列。明顯的是，具有缺失、修飾、取代、保守取代或添加了一些序列的氨基酸序列的變體也包括在本公開的范圍內，只要該氨基酸序列具有這樣的同源性或同一性并表現出對應于本公開的變體功效的功效。

其實例包括具有在上述氨基酸序列的N末端、C末端和/或氨基酸序列內部的不改變本公開變體功能的序列添加或缺失、天然存在的突變、沉默突變(silent?mutation)或保守取代的變體。