[發明專利]一種蜜環菌液體菌種的培養方法

無效

• 申請號: 201310009898.4
• 申請日: 2013-01-10
• 公開（公告）號: CN103070012A
• 公開（公告）日: 2013-05-01
• 發明（設計）人: 肖永東
• 申請（專利權）人: 關嶺自治縣豐碩食用菌農民專業合作社
• 主分類號: A01G1/04
• 分類號: A01G1/04;C05F11/00;C05G3/00
• 代理公司: 北京路浩知識產權代理有限公司 11002
• 代理人: 谷慶紅

技術領域

本發明屬于菌種培養技術領域，特別是涉及一種蜜環菌液體菌株的培養方法。

背景技術

蜜環菌(Arm111aria?mellea)屬擔子菌亞門，傘菌目，白蘑科，蜜環菌屬，是一種夏、秋季發生，能兼性寄生，藥食兼用的真菌。蜜環菌具有抗炎、抗腫瘤、抗輻射、促進造血機能、降低血糖、增強免疫力、提高記憶力等作用，還可治療由不同病因引起的眩暈綜合癥、血管性頭疼等常見病、多發病，并具有一定的抑制腫瘤生長等藥理和保健功能。目前已開發出多種與密環菌有關的藥品和保健品，如:蜜環菌片、腦心舒口服液、蜜環菌浸膏、蜜環菌糖漿等。

公知的蜜環菌培養方法有固態發酵和液體深層發酵。固態發酵周期過長、容易染菌、藥效成分分離困難；目前，液體深層發酵普遍受歡迎，但液體發酵存在發酵培養的培養基成本較高、種子菌質量不高，大小不一、發酵產物較低。

發明內容

針對上述問題，本發明提供一種蜜環菌液體菌株的培養方法,能有效地提高菌株的培養效率和質量。

為解決上述問題，本發明采取的技術方案為：

一種蜜環菌液體菌種的培養方法，該方法包括以下步驟：

1）制備母種：制作試管培養基并進行高壓滅菌30-45min，冷卻后在無菌環境下向試管培養基中接入豌豆粒大小的菌種塊，置于23-28℃環境中避光培養6-12天；

2）搖瓶培養：制備搖瓶培養基，然后將步驟1）中培養的母種進行碎化處理，在無菌環境下接種到搖瓶中，將接好種的搖瓶放在25-28℃，震蕩頻率500-650／min的電磁搖床上培養4-7天；

3）發酵罐培養：對發酵罐進行空罐滅菌，然后在發酵罐中配置發酵罐液體培養基，在液體培養基的表層或淺表層設置起支架作用的支撐物，并進行滅菌處理；將步驟2）中搖瓶培養的菌種流入發酵罐中，完成發酵罐接種；打開發酵罐的氣泵，設置通氣量為015-0.35L/min，溫度控制為25-28℃，使菌種在發酵罐中培養5-9天。

進一步，所述步驟1）中的試管培養基為每升培養含：玉米粉60-80g，黃豆粉10-15g，蔗糖(白糖)10-18g，PH值為5.5-6.5。

進一步，所述步驟2）中的搖瓶培養基和步驟3）中的發酵罐液體培養基均為為每升培養基含：大米面15-25g，白糖12-20g，酵母膏0.5-2g，蛋白胨3-9g，磷酸二氫鉀1.0-2.5g，硫酸鎂0.5-1.25g，PH值為5.5-6.5。

進一步，所述步驟3）中的起支撐作用的支撐物為：不銹鋼絲網或者海綿。

本發明的有益效果為：本發明利用玉米粉、大豆粉、大米粉和食用蔗糖為培養基，原料為成本低、易獲得的農副產品，不僅降低了生產成本，而且還提高了農副產品利用價值；同時，對種子菌進行碎化處理，可使菌球變小并大小一致，提高了種子菌的質量，加快了菌球生長速度，使蜜環菌深層液體發酵生長迅速、產量大幅提高。且本發明中采用靜置懸浮培養，菌株自培養基中吸取營養，自空氣中吸收氧份，菌絲體向下方生長直至長成粗壯的菌索并充滿整個發酵罐。所得到的菌索以干重法計，蜜環菌可達35-40g/L。相對于固態發酵或普通的液體深層發酵，操作簡單，分離方便，周期短，菌索產量高、活性多糖產率也高且穩定。

具體實施方式

下面結合具體實施例對本發明作進一步描述，在此發明的示意性實施例以及說明用來解釋本發明，但并不作為對本發明的限定。

實施例1

一種蜜環菌液體菌種的培養方法，該方法包括以下步驟：

1）制備母種：制作試管培養基，玉米粉75g，黃豆粉12g，蔗糖(白糖)13g，PH值為6.0。并進行高壓滅菌40min，冷卻后在無菌環境下向試管培養基中接入豌豆粒大小的菌種塊，置于25℃環境中避光培養10天；

2）搖瓶培養：制備搖瓶培養基，大米面20g，白糖15g，酵母膏1g，蛋白胨5g，磷酸二氫鉀2.0g，硫酸鎂1g，PH值為6.5。然后將步驟1）中培養的母種進行碎化處理，在無菌環境下接種到搖瓶中，將接好種的搖瓶放在25℃，震蕩頻率500／min的電磁搖床上培養4天；