[發(fā)明專利]ppc突變體及其在制備L-纈氨酸中的應(yīng)用

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 202111676686.2
• 申請日: 2021-12-31
• 公開（公告）號: CN114292315A
• 公開（公告）日: 2022-04-08
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 孟剛;趙春光;魏愛英;楊立鵬;賈慧萍;畢國東
• 申請（專利權(quán)）人: 寧夏伊品生物科技股份有限公司
• 主分類號: C07K14/34
• 分類號: C07K14/34;C12N15/31;C12N1/21;C12N15/77;C12P13/08;C12R1/15
• 代理公司: 北京紀(jì)凱知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11245
• 代理人: 李洋

1.一種ppc突變體，是將ppc蛋白質(zhì)第186位氨基酸殘基由甘氨酸突變?yōu)槠渌被釟埢玫降牡鞍踪|(zhì)；

所述ppc蛋白質(zhì)為如下A1)-A3)中的任一種：

A1)SEQ ID No.2所示的氨基酸序列組成的蛋白質(zhì)；

A2)將A1)所示的氨基酸序列經(jīng)過除第186位氨基酸殘基以外的一個(gè)或幾個(gè)氨基酸殘基的取代和/或缺失和/或添加得到的與細(xì)菌產(chǎn)纈氨酸相關(guān)的蛋白質(zhì)；

A3)來源于細(xì)菌且與A1)或A2)具有95％以上同一性且與細(xì)菌產(chǎn)纈氨酸相關(guān)的蛋白質(zhì)。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的ppc突變體，其特征在于：所述ppc突變體是將ppc蛋白質(zhì)第186位氨基酸殘基由甘氨酸突變?yōu)榫彼岬玫降牡鞍踪|(zhì)。

3.與權(quán)利要求1所述ppc突變體相關(guān)的生物材料，所述生物材料為如下B1)至B4)中的任一種：

B1)編碼權(quán)利要求1或2所述ppc突變體的核酸分子；

B2)含有B1)所述核酸分子的表達(dá)盒；

B3)含有B1)所述核酸分子的重組載體、或含有B2)所述表達(dá)盒的重組載體；

B4)含有B1)所述核酸分子的重組微生物、或含有B2)所述表達(dá)盒的重組微生物、或含有B3)所述重組載體的重組微生物。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的生物材料，其特征在于：所述核酸分子為如下C1)或C2)中的任一種：

C1)核苷酸序列為SEQ ID No.3的DNA分子；

C2)將SEQ ID No.3所示的核苷酸序列經(jīng)過修飾和/或一個(gè)或幾個(gè)核苷酸的取代和/或缺失和/或添加得到的與C1)所示的DNA分子具有90％以上的同一性，且具有相同功能的DNA分子。

5.ppc蛋白質(zhì)或與ppc蛋白質(zhì)相關(guān)的生物材料或權(quán)利要求1所述的ppc突變體或權(quán)利要求2所述的生物材料在如下X1)至X4)中任一種中的應(yīng)用：

X1)調(diào)控細(xì)菌纈氨酸產(chǎn)量；

X2)構(gòu)建產(chǎn)纈氨酸工程菌；

X3)制備纈氨酸；

所述ppc蛋白質(zhì)為權(quán)利要求1中所述ppc蛋白質(zhì)；

與ppc蛋白質(zhì)相關(guān)的生物材料為如下D1)至D4)中的任一種：

D1)編碼所述ppc蛋白質(zhì)的核酸分子；

D2)含有D1)所述核酸分子的表達(dá)盒；

D3)含有D1)所述核酸分子的重組載體、或含有D2)所述表達(dá)盒的重組載體；

D4)含有D1)所述核酸分子的重組微生物、或含有D2)所述表達(dá)盒的重組微生物、或含有D3)所述重組載體的重組微生物。

6.提高ppc蛋白質(zhì)或ppc突變體含量和/或活性的物質(zhì)或提高ppc基因或ppc突變體基因表達(dá)量的物質(zhì)在如下Y1)至Y4)中任一種中的應(yīng)用：

Y1)提高細(xì)菌纈氨酸產(chǎn)量；

Y2)構(gòu)建產(chǎn)纈氨酸工程菌；

Y3)制備纈氨酸；

所述ppc蛋白質(zhì)為權(quán)利要求1中所述ppc蛋白質(zhì)；

所述ppc突變體為權(quán)利要求1所述ppc突變體；

所述ppc基因?yàn)榫幋a權(quán)利要求1中所述ppc蛋白質(zhì)的基因；

所述ppc突變體基因?yàn)榫幋a權(quán)利要求1所述ppc突變體的基因。

7.一種提高細(xì)菌纈氨酸產(chǎn)量的方法，為如下M1)或M2)：

所述M1)包括如下步驟：將細(xì)菌基因組中的ppc基因替換為ppc突變體基因，實(shí)現(xiàn)細(xì)菌纈氨酸產(chǎn)量的提高；

所述M2)包括如下步驟：提高細(xì)菌中ppc蛋白質(zhì)或ppc突變體含量和/或活性，或提高細(xì)菌中ppc基因或ppc突變體基因表達(dá)量，實(shí)現(xiàn)細(xì)菌纈氨酸產(chǎn)量的提高；

所述ppc蛋白質(zhì)為權(quán)利要求1中所述ppc蛋白質(zhì)；

所述ppc突變體為權(quán)利要求1所述ppc突變體；

所述ppc基因?yàn)榫幋a權(quán)利要求1中所述ppc蛋白質(zhì)的基因；

所述ppc突變體基因?yàn)榫幋a權(quán)利要求1所述ppc突變體的基因。