[發明專利]一種調控CD276基因表達的方法

有效

• 申請號: 202111657288.6
• 申請日: 2021-12-30
• 公開（公告）號: CN114395561B
• 公開（公告）日: 2023-02-28
• 發明（設計）人: 宋冰;邵田;王錦蕊;田文彤;白鵬超
• 申請（專利權）人: 鄭州大學
• 主分類號: C12N15/12
• 分類號: C12N15/12;G01N33/68
• 代理公司: 北京蕙識同聯專利代理事務所(特殊普通合伙) 11966
• 代理人: 劉曄

本申請涉及一種調控CD276基因表達的方法，其包括采用一種特異性調控CD276表達的物質。本申請還分析了其中的調控機制，并最終確定了一個新的藥物靶點。本申請的方法能有效抑制細胞增殖、侵襲和轉移，同時能依據該物質或調控機制篩選出對靶向CD276的藥物或治療敏感的病人，以便進行精準治療，因此，具有良好的臨床應用前景。

技術領域

本申請涉及一種調控CD276基因表達的方法，屬于生物技術領域。

背景技術

癌癥是惡性腫瘤的統稱，其特點為不正常細胞失控分裂、無限增殖、侵入并破壞周圍正常組織。癌癥是全球第二大死因，每年導致約1千萬人死亡，全球大約六分之一的死亡由癌癥造成。目前，化療仍是癌癥治療主要手段，但遠未達到理想的效果。近年來，隨著靶向治療或精準治療被證實能夠極大改善癌癥患者的治療效果，靶向治療或精準治療日益成為抗腫瘤治療領域的熱點。然而，靶向治療或精準治療的發展依然受到多方面條件的限制，很大程度上歸結于沒有找到合適的靶點，以及缺乏準確地對各類病人進行分型的方法。

在癌癥的免疫治療方法中，采用檢查點的抑制劑治療是目前最常用的免疫治療方案。B7-H3(CD276)是B7和CD28家族重要的免疫檢查點成員,在多種惡性腫瘤中均有表達，并且與惡性腫瘤的生長、轉移、復發、預后不良等因素密切相關，因此，亟需篩選出一種特異性針對CD276的調控物質，并厘清其中的調控機制，從而開發新的藥物靶點，以達到有效抑制細胞增殖、侵襲和轉移的效果，同時能依據該調控物質或調控機制篩選出對靶向CD276的藥物或治療敏感的病人，以便進行精準治療。

發明內容

鑒于上述技術問題，本申請一種調控CD276基因表達的方法。

發明人首次發現FKHD家族蛋白與CD276之間存在緊密的關聯性。FKHD家族蛋白能特異性地調控CD276的表達，而該調控的靶點序列為CD276基因增強子中的FKHD基序。本申請將通過具體的FKHD家族蛋白FOXA1在某細胞(前列腺癌細胞)中的實驗來示例性闡述本申請的核心技術思想。

第一方面，本申請提供了一種調控細胞中CD276基因表達的方法，包括改變FKHD家族蛋白在所述細胞中的表達量或活性的步驟；或者包括在所述細胞中，干預FKHD家族蛋白與CD276基因的增強子相結合的步驟；或者包括在所述細胞中，編輯CD276基因的增強子中的FKHD基序的步驟。

所屬領域技術人員知道，蛋白功能的發揮通常與蛋白的表達量和活性有關，因此，FKHD家族蛋白特異性地調控CD276的表達時，改變FKHD家族蛋白的表達量或活性都能影響其對CD276的調控作用。

在一些實施方式中，“調控”為抑制或增強。

在一些實施方式中，“改變”為增加或減少；其可以通過本領域的常規技術手段來實現，包括但不限于加入能增加FKHD家族蛋白表達量或活性的促進劑或激動劑，或者加入能減少FKHD家族蛋白表達量或活性的抑制劑或阻遏劑，或者編輯FKHD家族蛋白的核酸序列，或者使FKHD家族蛋白在細胞中重組表達等；這些物質例如EZH2或其抑制劑GSK126、EPZ-6438、BET或其抑制劑JQ1、LSD1或其抑制劑GSK2879552。

在一些實施方式中，“干預”為促進或阻礙；其可以通過本領域的常規技術手段來實現，包括但不限于加入FKHD家族蛋白的競爭性配體，從而阻礙FKHD家族蛋白與CD276基因的增強子結合；或者編輯CD276基因的增強子序列，以促進或阻礙FKHD家族蛋白與CD276基因的增強子結合等。

在一些實施方式中，“編輯”為突變、修飾或敲除；其可以通過本領域的常規技術手段來實現，包括但不限于點突變、移碼突變、重排、甲基化修飾、化學修飾、基因打靶、基因編輯、基因沉默(例如采用siRNA、shRNA質粒和shRNA慢病毒顆粒)等。

在一些實施方式中，FKHD基序的序列如SEQ ID NO.1或SEQ ID NO.2所示，或者CD276基因的增強子的序列如SEQ ID NO.3所示。