[發明專利]一種水稻雌性核不育基因工程表達載體及其應用

在審

• 申請號: 202111643733.3
• 申請日: 2021-12-29
• 公開（公告）號: CN114317599A
• 公開（公告）日: 2022-04-12
• 發明（設計）人: 李東宣;陳麗娟;李偉;朱騫;郭效瓊;吳文斌;余衛霖;李仕川;羅迪;王天杰;王春麗
• 申請（專利權）人: 云南農業大學
• 主分類號: C12N15/84
• 分類號: C12N15/84;C12N15/29;A01H5/00;A01H6/46;A01H1/02
• 代理公司: 云南凌云律師事務所 53207
• 代理人: 康珉

1.一種水稻雌性核不育基因工程表達載體(pFST::FST//p35S::BTZ-RNAi)，其特征在于，包括用于轉基因水稻雌性育性互補的FST基因表達元件(FST^T)和用于轉基因篩除的苯達松敏感致死的水稻CYP81A6基因的功能性RNAi元件(p35S::BTZ-RNAi)。

2.如權利要求1所述的水稻雌性核不育基因工程表達載體(pFST::FST//p35S::BTZ-RNAi)，其特征在于，所述用于轉基因水稻雌性育性互補的FST基因表達元件(FST^T)的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，所述用于轉基因篩除的苯達松敏感致死的水稻CYP81A6基因的功能性RNAi元件(p35S::BTZ-RNAi)的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。

3.一種純合的非轉基因水稻雌性核不育系的繁殖方法，其特征在于，包括如下步驟：

(1)將權利要求1或2所述的水稻雌性核不育基因工程表達載體(pFST::FST//p35S::BTZ-RNAi)導入純合的雌性核不育(fst/fst)水稻植株，篩選獲得雜合型轉基因水稻，即基因工程水稻雌性核不育系(FST^T/fst)；

(2)基因工程水稻雌性核不育系(FST^T/fst)自交結實，收獲T₁種子；

(3)在T₁種子育苗苗期，葉面噴施苯達松溶液，轉基因幼苗(FST^T/FST^T和FST^T/fst)被除草劑苯達松致死篩除，分離出的純合的非轉基因水稻雌性不育幼苗(fst/fst)即為純合的非轉基因水稻雌性核不育系。

4.如權利要求3所述的方法，其特征在于，步驟(3)中所述的苗期為T₁種子育苗至3葉期。

5.如權利要求3所述的方法，其特征在于，步驟(3)中所述的苯達松溶液的噴施濃度為1200mg/L，噴至葉面有水滴附著為止。

6.如權利要求3或4或5所述的純合的非轉基因水稻雌性核不育系繁殖的方法，其特征在于，步驟(1)中所述的純合的雌性核不育(fst/fst)水稻植株為云嶺319FS植株。

7.權利要求3至6任一權利要求所述的純合的非轉基因水稻雌性核不育系的繁殖方法在水稻雜交制種中的應用。