[發明專利]一種環保用復合微生物菌劑固體顆粒的制備方法

在審

• 申請號: 202111631775.5
• 申請日: 2021-12-29
• 公開（公告）號: CN114107277A
• 公開（公告）日: 2022-03-01
• 發明（設計）人: 劉玲子;王海榮
• 申請（專利權）人: 蘇州和青環境科技有限公司
• 主分類號: C12N11/14
• 分類號: C12N11/14;C12N1/20;C02F3/34
• 代理公司: 蘇州國卓知識產權代理有限公司 32331
• 代理人: 張入文

1.一種環保用復合微生物菌劑固體顆粒的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：(1)進行環保用復合微生物的高密度發酵培養，得到高密度發酵液，調整高密度發酵液中的微生物的固含量為30-80％；(2)往調整后的高密度發酵液中添加生物陶粒/火山巖/沸石混合均勻；(3)所述高密度發酵液在40-90℃下烘干，烘干時間為12-36h，得到環保用復合微生物菌劑固體顆粒產品。

2.如權利要求1所述的環保用復合微生物菌劑固體顆粒的制備方法，其特征在于，在所述步驟(1)中，環保用復合微生物的高密度發酵培養包括以下步驟：步驟A：將環保用復合微生物的菌種接種于含基礎培養基的搖瓶中，在15-50℃下震蕩培養8-24h，震蕩培養轉速為100-400rpm，得一級種子液；步驟B：將步驟A得到的一級種子液按1％-25％的接種量轉接于一級種子罐中，培養8-24h，培養溫度為15-50℃，罐壓為0.02-0.08MPa，溶解氧的濃度為10-75％，得到二級種子液；步驟C：將步驟B得到的二級種子液按5％-25％的接種量轉接于發酵罐中進行分段發酵，各段發酵的pH依次調整為7.4-7.8、6.8-7.2、6.2-6.6和5.2-5.8，各段的發酵時間均為5h-12.5h，發酵溫度均為20℃-39℃，罐壓均為0.02MPa-0.08MPa，溶解氧的濃度均為10％-75％。

3.如權利要求2所述的環保用復合微生物菌劑固體顆粒的制備方法，其特征在于，在所述步驟C的分段發酵過程中，根據所述二級種子液中的pH和溶解氧含量的變化，流加碳源和氮源，當分段發酵過程中pH、溶解氧驟然上升，即碳源不足時，流加發酵液即所述二級種子液體積4％-15％的碳源；當發酵過程pH驟然下降、溶解氧驟然上升，即氮源不足時，流加發酵液體積即所述二級種子液1％-3％的氮源。

4.如權利要求3所述的環保用復合微生物菌劑固體顆粒的制備方法，其特征在于，所述碳源為葡萄糖、蔗糖和糖蜜中的至少一種；所述氮源為氯化銨、硫酸銨、玉米漿、玉米漿干粉或酵母粉中的至少一種。

5.如權利要求2所述的環保用復合微生物菌劑固體顆粒的制備方法，其特征在于，所述步驟A中的基礎培養基由以下質量百分比的原料組成：葡萄糖1.5％-3％，硫酸銨0.2％-0.8％，有機氮源0.5％-1.5％，磷酸二氫鈉0.4％-2.5％，乙酸鈉0.1％-0.3％，七水硫酸鎂0.5％-1.6％，微量元素補充劑0.1-2％，水。

6.如權利要求5所述的環保用復合微生物菌劑固體顆粒的制備方法，其特征在于，所述微量元素補充劑包括以下含量的成分：無水氯化鈣0.03％-0.05％，七水硫酸亞鐵0.02％-0.04％，七水硫酸鋅0.01％-0.02％，五水硫酸錳0.005％-0.02％，五水硫酸銅0.0001％-0.0008％，硼酸0.0001-0.0005％。

7.如權利要求2所述的環保用復合微生物菌劑固體顆粒的制備方法，其特征在于，在所述步驟C中進行分段發酵pH值的所用酸為磷酸、硫酸、鹽酸、乙酸和硝酸中的至少一種，所用堿為氫氧化鈉、氫氧化鉀、氨水和尿素中的至少一種。

8.如權利要求2所述的環保用復合微生物菌劑固體顆粒的制備方法，其特征在于，在所述步驟C中分段發酵后組成環保用復合微生物的各微生物菌種含量均不少于10CFU/mL。

9.如權利要求1所述的環保用復合微生物菌劑固體顆粒的制備方法，其特征在于，所述步驟(1)中，所述環保用復合微生物的高密度發酵培養材料由第一菌劑、第二菌劑和第三菌劑復配而成，所述第一菌劑、第二菌劑和第三菌劑的質量比為(1-2):(0.1-3):(1-5)。

10.如權利要求9所述的環保用復合微生物菌劑固體顆粒的制備方法，其特征在于，所述第一菌劑為產堿菌、節桿菌、黃桿菌和假單胞菌中的至少一種；所述第二菌劑為伯克氏菌、短桿菌、假諾卡氏菌、黃單胞菌、芽孢桿菌、棒桿菌、紅球菌、鞘氨醇單胞菌和戈登氏菌中的至少一種；所述第三菌劑為生絲微菌、乳酸桿菌和冢村氏菌中的的至少一種。