[發明專利]一株高產蛋白酶的解淀粉芽孢桿菌及其應用

有效

• 申請號: 202111620797.1
• 申請日: 2021-12-28
• 公開（公告）號: CN114350553B
• 公開（公告）日: 2023-08-22
• 發明（設計）人: 馬正;李慧杰;韓濤;王驥騰;俞曉平
• 申請（專利權）人: 中國計量大學;浙江海洋大學
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;A23K10/37;A23K10/12;A23K50/80;C12R1/07
• 代理公司: 杭州求是專利事務所有限公司 33200
• 代理人: 林松海

本發明公開了一株高產蛋白酶的解淀粉芽孢桿菌及其應用。菌株LX?6分類命名為解淀粉芽孢桿菌（Bacillus?amyloliquefaciens）LX?6，保藏單位：中國典型培養物保藏中心，保藏日：2021年11月22日，保藏登記號為CCTCC?No:M20211457。所述的解淀粉芽孢桿菌產高效蛋白酶，根據SB/T?10317?1999蛋白酶活力測定法測定，其蛋白酶活力達1390.6±12.5?U/mL，利用此菌株進行豆粕固態發酵，SDS?PAGE檢測表明24h后豆粕中的大分子蛋白顯著降解，48小時后不見大豆抗原蛋白，在利用微生物法固態發酵豆粕領域達到領先水平。利用B.amyloliquefaciens?LX?6的高產蛋白酶活力，對豆粕等飼料中的大分子蛋白有較顯著的降解能力，降低飼料中的抗營養因子，對提高飼料消化吸收率和使用效益，降低養殖成本，具有巨大的應用潛力。

技術領域

本發明涉及微生物技術領域，涉及一株產蛋白酶的解淀粉芽孢桿菌LX-6及其在降低豆粕等飼料中的粗蛋白、減少抗營養因子等方面的應用。

背景技術

豆粕是目前使用最為廣泛的飼料工業原料，與動物源性蛋白飼料相比，具有貨源充足、含毒害物質概率低、安全系數高等特點，是作為飼料的理想材料。近年來，水產養殖業發展迅猛，水產飼料蛋白源匱乏日趨嚴重，水產動物不同于畜禽等單胃動物和反芻動物，其對營養物質的需求、攝取、消化與吸收等方面都有較高需求。國內外諸多學者發現大豆具有良好的營養品質，大豆粕等大豆制品可作為魚粉代用品用于水產飼料。豆粕含有大量蛋白質，但其蛋白質分子結構復雜，相對分子量較大，存在抗營養因子等問題。尤其是大豆抗原蛋白(大豆球蛋白和β-伴大豆球蛋白)對水產動物健康的有害影響更為顯著，主要體現在延緩生長速度、降低營養物質消化，大大降低了動物對豆粕營養的吸收利用，影響了豆粕的使用價值和應用范圍。

為實現豆粕的高效利用，在使用過程中，常需通過一些方法降低豆粕中的部分致敏因子和抗營養因子，如利用膨化、蒸煮可使其熱敏因子失活，大豆蛋白部分分解，胰蛋白酶抑制因子活性降低等。相關研究表明，利用微生物發酵可提高豆粕的營養價值。一方面微生物可以有效降解抗營養因子；另一方面，降解大分子蛋白質產生的小肽在腸道中容易和礦物元素結合成可溶性的鰲合物而促進無機鹽離子的吸收。由于芽孢桿菌具有生長周期短、發酵成本低廉，其發酵豆粕粗蛋白含量高等優點，利用芽孢桿菌生產發酵豆粕已成為研究趨勢。劉星等利用枯草芽孢桿菌發酵，豆粕總蛋白從45.28%提高至48.37%。高蛋白酶活性是芽孢桿菌生產發酵豆粕的關鍵。鄭麗等人篩選到一株產蛋白酶芽孢桿菌，產蛋白酶水平維持在500-700?U/mL，發酵豆粕60?h后仍有部分粗蛋白未能降解。

劉星，趙榮，李波，等.?幾種不同菌種發酵豆粕發酵過程指標對比.?動物營養.2020,1:20-23.

鄭麗，李達，牛紅紅，等.?產蛋白酶芽孢桿菌的篩選及其發酵對豆粕的影響.?食品科學.?2019,40(20):185-191。

發明內容

為了克服現有技術的不足，本發明的第一個目的在于通過篩選提供具有較強蛋白酶活性的一株芽孢桿菌——解淀粉芽孢桿菌（ Bacillus?amyloliquefaciens）LX-6。

本發明的第二個目的是利用 B.?amyloliquefaciensLX-6高蛋白酶活性，固態發酵豆粕以降解其中大分子蛋白，降低抗營養因子，提高豆粕的使用價值。

本發明的目的是通過以下技術手段得以實現：