[發明專利]橄欖鏈霉菌及其在生物合成香蘭素中的應用

有效

• 申請號: 202111616530.5
• 申請日: 2021-12-27
• 公開（公告）號: CN114437963B
• 公開（公告）日: 2023-08-22
• 發明（設計）人: 裴亮;潘月;華君;華卿汝
• 申請（專利權）人: 四川盈嘉合生科技有限公司
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12P7/24;C12R1/465
• 代理公司: 成都希盛知識產權代理有限公司 51226
• 代理人: 張徭堯;柯海軍

1.橄欖鏈霉菌，其特征在于：所述橄欖鏈霉菌的菌株拉丁名為Streptomyces?olivaceus，于2021年08月16日保藏于中國普通微生物菌種保藏管理中心，保藏編號為CGMCC?No.23152。

2.權利要求1所述的橄欖鏈霉菌在生物合成香蘭素中的應用。

3.一種香蘭素的生產方法，其特征在于：利用橄欖鏈霉菌作為轉化菌株，阿魏酸為轉化底物，進行生物轉化，得到香蘭素，其中，所述橄欖鏈霉菌為權利要求1所述的橄欖鏈霉菌。

4.根據權利要求3所述的香蘭素的生產方法，其特征在于：阿魏酸的純度為50～98%。

5.根據權利要求4所述的香蘭素的生產方法，其特征在于：阿魏酸的純度為60～85%。

6.根據權利要求3所述的香蘭素的生產方法，其特征在于，包括以下步驟：

1）菌體的培養：將橄欖鏈霉菌的菌種接種于培養基中培養，得到菌液；

2）阿魏酸的轉化：將菌液與滅菌后的阿魏酸溶液混合，繼續培養，得到含香蘭素的發酵液；

3）產物收獲：收獲含香蘭素的發酵液，去除菌體，將上清液進行分離純化，獲得香蘭素。

7.根據權利要求6所述的香蘭素的生產方法，其特征在于：步驟1）中，所述培養的具體方法為：先將菌種接種于斜面培養基，20～35℃培養2～3天，挑取表面菌絲體，接種于液體種子培養基，20～35℃培養2～3天獲得種子液，再轉接發酵培養基，20～35℃培養2～3天，得到菌液；步驟2）中，菌液與滅菌后的阿魏酸溶液混合后，阿魏酸的有效濃度為1～50g/L；繼續培養的培養時間為3～4天。

8.根據權利要求6所述的香蘭素的生產方法，其特征在于：步驟3）中，分離純化的具體方法為：將上清液的pH值調節至弱堿性，采用大孔吸附樹脂柱進行吸附，用純水頂洗，再用洗脫液進行洗脫，收集洗脫液，將pH調至酸性，濃縮，添加活性炭吸附色素和雜質，過濾后再次濃縮，結晶，得到香蘭素。

9.一種阿魏酸生產香蘭素的方法，其特征在于，包括以下步驟：

a、代謝產物的培養：將權利要求1所述的橄欖鏈霉菌的菌種接種于培養基中培養，收獲發酵液，去除菌體，獲得上清液；

b、阿魏酸的轉化：向上清液中加入阿魏酸，配制成1～20g/L的溶液，繼續轉化4～5天，獲得含香蘭素的轉化液；c、產物收獲：將含香蘭素的轉化液的pH值調節至弱堿性，采用大孔吸附樹脂柱進行吸附，用純水頂洗，再用洗脫液進行洗脫，收集洗脫液，將pH調至酸性，濃縮，添加活性炭吸附色素和雜質，過濾后再次濃縮，結晶，得到香蘭素。

10.根據權利要求9所述的阿魏酸生產香蘭素的方法，其特征在于：步驟b中，加入阿魏酸后，還加入大孔吸附樹脂。