[發明專利]一種透明質酸的生產方法

在審

• 申請號: 202111609573.0
• 申請日: 2021-12-24
• 公開（公告）號: CN114150030A
• 公開（公告）日: 2022-03-08
• 發明（設計）人: 嚴必能;詹光煌;劉子睿;徐魯明;賴榮乾;胡麗娜;陳必欽;李丹
• 申請（專利權）人: 內蒙古金達威藥業有限公司;廈門金達威集團股份有限公司;金達威生物技術（江蘇）有限公司
• 主分類號: C12P19/26
• 分類號: C12P19/26;C12N1/38;C12N1/20;C12R1/46
• 代理公司: 廈門荔信律和知識產權代理有限公司 35282
• 代理人: 賴秀華

1.一種透明質酸的生產方法，其特征在于，該方法包括在發酵培養過程中，當透明質酸發酵液中氧消耗速率首次達到12～20mmol/L·h時，往透明質酸發酵液中添加乙偶姻。

2.根據權利要求1所述的透明質酸的生產方法，其特征在于，在發酵培養過程中，當透明質酸發酵液中氧消耗速率首次達到14～18mmol/L·h時，往透明質酸發酵液中添加乙偶姻。

3.根據權利要求1所述的透明質酸的生產方法，其特征在于，所述乙偶姻的添加比例為透明質酸發酵液的0.1～0.5wt％。

4.根據權利要求1所述的透明質酸的生產方法，其特征在于，所述透明質酸的生產菌株為獸疫鏈球菌(Streptococcus zooepidemicus)。

5.根據權利要求1所述的透明質酸的生產方法，其特征在于，當發酵液中殘糖含量≤5g/L時結束發酵。

6.根據權利要求1～5中任意一項所述的透明質酸的生產方法，其特征在于，所述透明質酸的生產方法包括以下步驟：

(1)菌種活化：在無菌條件下，將透明質酸生產菌株劃線于平板培養基中，在溫度32～38℃下培養18～24h；

(2)種子培養：從培養好的平板培養基上挑取單菌落，接入搖瓶培養基，然后放置于搖床中，在溫度32～38℃、轉速160～220rpm條件下培養8～18h，得到種子培養液；任選地，將所得種子培養液以0.5～5％接種量接入裝有搖瓶培養基的種子罐中并在溫度32～38℃、通氣比0.3～1VVM、轉速150～300rpm、罐壓0.03～0.05MPa條件下培養5～10h，得到種子液；

(3)發酵培養：將培養好的種子培養液或種子液以1～10％接種量接入裝有發酵培養基的發酵罐中，在溫度32～38℃、通氣比0.5～1.5VVM、轉速80～300rpm、罐壓0.04～0.06MPa和pH 6.5～8.0條件下進行發酵培養，當發酵液中氧消耗速率首次達到預定值時，往發酵液中添加乙偶姻，繼續培養，當發酵液中殘糖含量≤5g/L時結束發酵。

7.根據權利要求6所述的透明質酸的生產方法，其特征在于，步驟(1)中，所述平板培養基為牛肉膏蛋白胨瓊脂培養基。

8.根據權利要求6所述的透明質酸的生產方法，其特征在于，步驟(2)中，所述搖瓶培養基為牛肉膏蛋白胨培養基。

9.根據權利要求6所述的透明質酸的生產方法，其特征在于，步驟(3)中，所述發酵培養基的pH值為6.5～7.5，且每升發酵培養基中含有如下組分：葡萄糖60～80g、蛋白胨5～15g、酵母浸膏2～6g、谷氨酸鈉0.5～2g、磷酸二氫鉀0.1～1g、硫酸鎂0.1～1g、泡敵0.1～1g。

10.根據權利要求6所述的透明質酸的生產方法，其特征在于，所述發酵培養所采用的發酵罐容積為30L～100m³。