[發明專利]檢測14種呼吸道感染病原菌的引物探針組合、試劑盒及其應用

在審

• 申請號: 202111604401.4
• 申請日: 2021-12-24
• 公開（公告）號: CN114317786A
• 公開（公告）日: 2022-04-12
• 發明（設計）人: 黃仕藝;白立寬;杜錦然;陳江坡;張志達;王文軒;胖鐵良
• 申請（專利權）人: 廊坊諾道中科醫學檢驗實驗室有限公司
• 主分類號: C12Q1/689
• 分類號: C12Q1/689;C12Q1/686;C12Q1/14;C12Q1/10;C12Q1/04;C12N15/11
• 代理公司: 石家莊國鉞天璽專利代理事務所(普通合伙) 13155
• 代理人: 王朝

1.一種檢測14種呼吸道感染病原菌的引物探針組合，其特征在于，

檢測肺炎克雷伯菌的正向引物如SEQ ID NO：1所示，反向引物如SEQ ID NO：2所示，探針如SEQ ID NO：3所示；

檢測金黃色葡萄球菌的正向引物如SEQ ID NO：4所示，反向引物如SEQ ID NO：5所示，探針如SEQ ID NO：6所示；

檢測流感嗜血桿菌的正向引物如SEQ ID NO：7所示，反向引物如SEQ ID NO：8所示，探針如SEQ ID NO：9所示；

檢測銅綠假單胞菌的正向引物如SEQ ID NO：10所示，反向引物如SEQ ID NO：11所示，探針如SEQ ID NO：12所示；

檢測鮑曼不動桿菌的正向引物如SEQ ID NO：13所示，反向引物如SEQ ID NO：14所示，探針如SEQ ID NO：15所示；

檢測肺炎衣原體的正向引物如SEQ ID NO：16所示，反向引物如SEQ ID NO：17所示，探針如SEQ ID NO：18所示；

檢測肺炎鏈球菌的正向引物如SEQ ID NO：19所示，反向引物如SEQ ID NO：20所示，探針如SEQ ID NO：21所示；

檢測大腸桿菌的正向引物如SEQ ID NO：22所示，反向引物如SEQ ID NO：23所示，探針如SEQ ID NO：24所示；

檢測肺炎支原體的正向引物如SEQ ID NO：25所示，反向引物如SEQ ID NO：26所示，探針如SEQ ID NO：27所示；

檢測嗜麥芽假單胞菌的正向引物如SEQ ID NO：28所示，反向引物如SEQ ID NO：29所示，探針如SEQ ID NO：30所示；

檢測陰溝腸桿菌的正向引物如SEQ ID NO：31所示，反向引物如SEQ ID NO：32所示，探針如SEQ ID NO：33所示；

檢測嗜肺軍團菌的正向引物如SEQ ID NO：34所示，反向引物如SEQ ID NO：35所示，探針如SEQ ID NO：36所示；

檢測結核分枝桿菌的正向引物如SEQ ID NO：37所示，反向引物如SEQ ID NO：38所示，探針如SEQ ID NO：39所示；

檢測耐甲氧西林黃色葡萄球菌的正向引物如SEQ ID NO：40所示，反向引物如SEQ IDNO：41所示，探針如SEQ ID NO：42所示。

2.包含權利要求1所述的檢測14種呼吸道感染病原菌的引物探針組合的試劑盒。

3.根據權利要求2所述的試劑盒，其特征在于，所述試劑盒的檢測分為4組，分別為：

第一組檢測金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌、流感嗜血桿菌和肺炎克雷伯菌；

第二組檢測鮑曼不動桿菌、肺炎鏈球菌和肺炎衣原體；

第三組檢測大腸桿菌、嗜麥芽假單胞菌、肺炎支原體和陰溝腸桿菌；

第四組檢測耐甲氧西林黃色葡萄球菌、嗜肺軍團菌、結核分枝桿菌。

4.根據權利要求3所述的試劑盒，其特征在于，所述試劑盒中的試劑包括：4組引物探針組合液、TAKRA酶Mix和DEPC水。

5.根據權利要求4所述的試劑盒，其特征在于，4組中的任一單組所述引物探針組合液中含有的任一引物的濃度均為5μmol/L、任一探針的濃度均為2.5μmol/L。

6.權利要求2-5中任一項所述的試劑盒在檢測/輔助檢測14種呼吸道感染病原菌中的應用。

7.根據權利要求6所述的應用，其特征在于，所述應用的具體步驟是取待測樣本提取待測樣本核酸后分別與試劑盒中的試劑混合制成4組反應體系，振蕩混勻，離心，進行PCR擴增反應，獲得4組擴增曲線圖和CT值，再根據所得4組擴增曲線圖和CT值判斷待測樣本呈陽性/陰性。

8.根據權利要求7所述的試劑盒，其特征在于，單組所述反應體系為待測樣本核酸4μL、TAKRA酶Mix 10μL、單組引物探針組合液2μL，補DEPC水至20μL。