[發(fā)明專利]一種葛仙米多糖的提取方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 202111603911.X
• 申請日: 2021-12-25
• 公開（公告）號: CN114181326B
• 公開（公告）日: 2023-05-09
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 王翠霞;余佳;唐丹;王燦;鄭小娟;付夏娜;張瑞華
• 申請（專利權(quán)）人: 湖南炎帝生物工程有限公司
• 主分類號: C08B37/00
• 分類號: C08B37/00
• 代理公司: 長沙大珂知識產(chǎn)權(quán)代理事務所(普通合伙) 43236
• 代理人: 王瓊琦

本發(fā)明涉及提取技術(shù)領(lǐng)域，具體為一種葛仙米多糖的提取方法，將葛仙米烘至恒重后粉碎，得到葛仙米粉末，將葛仙米粉末加入40?45℃的氫氧化鈉溶液中浸泡后濾出蒸汽爆破處理再加入磷酸氫二鈉?檸檬酸緩沖溶液中加入復合酶制劑，酶解得到葛仙米粗多糖，再將葛仙米粗多糖純化即可，利用本發(fā)明方法制備得到葛仙米多糖純度達到97％以上，且得率較高，具有較廣泛的應用前景。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及提取技術(shù)領(lǐng)域，具體為一種葛仙米多糖的提取方法。

背景技術(shù)

葛仙米是藍藻門念珠藻科的一種低等單細胞藍藻，古名天仙菜、天仙米俗稱水木耳。據(jù)《綱目拾遺》記載葛仙米“性寒味甘爽”具有“解熱，清膈利腸胃”的功效，是不可多得的天然無公害綠色食品。葛仙米中多糖含量豐富且具有多種生理活性，受到醫(yī)學和食品學界的高度關(guān)注，莫開菊發(fā)現(xiàn)野生葛仙米多糖的抗氧化性較弱，但可以降低胸腺指數(shù)和抑制由腫瘤導致細胞免疫下降，且對腎臟組織無毒性；彭常安等通過MTT比色法發(fā)現(xiàn)葛仙米多糖對HCT-116細胞的增殖具有較好的抑制能力；常向東等采用濾紙貼片法研究葛仙米水溶性多糖對金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、綠膿桿菌和霉菌均有抑制作用；朱玉婷等發(fā)現(xiàn)經(jīng)過硫酸酯化的葛仙米多糖具有抗凝血功能，但是目前葛仙米多糖的提取方法費時費力，且純度和收率較低。

發(fā)明內(nèi)容

發(fā)明目的：針對上述技術(shù)問題，本發(fā)明提供了一種葛仙米多糖的提取方法。

所采用的技術(shù)方案如下：

一種葛仙米多糖的提取方法，包括以下步驟：

S1：將葛仙米烘至恒重后粉碎，得到葛仙米粉末；

S2：將葛仙米粉末加入40-45℃的氫氧化鈉溶液中浸泡2-4h后濾出，轉(zhuǎn)移至蒸汽爆破設(shè)備中，密封后通入飽和蒸汽，直至蒸汽爆破設(shè)備中壓力達到6-8MPa，保壓10-15min后打開閥門泄壓，收集所獲得固體加入磷酸氫二鈉-檸檬酸緩沖溶液中，攪拌20-40min后加入復合酶制劑，升溫至55-65℃酶解8-12h；

S3：酶解結(jié)束后將溶液升溫至回流5-10h后離心，上清液加入5-10倍體積的乙醇，3-5℃靜置10-15h，過濾，得到葛仙米粗多糖；

S4：將葛仙米粗多糖用水溶解后，加入氯仿-正丁醇溶液，振蕩20-40min?后離心，從上清液中分離出水相，再加入氯仿-正丁醇溶液，繼續(xù)振蕩，重復上述操作3-5次后水相減壓濃縮蒸出低沸點組分得到濃縮液，向濃縮液中加入飽和氯化鈉溶液和乙醇，3-5℃靜置10-15h后過濾，所得固體40-60℃真空干燥即可。

進一步地，S2中所述氫氧化鈉溶液的摩爾濃度為0.2-0.6mol/L，料液比為1：80-120。

進一步地，S2中所述復合酶制劑由纖維素酶、木瓜蛋白酶、中性蛋白酶組成。

進一步地，S2中所述纖維素酶、木瓜蛋白酶、中性蛋白酶的重量比為?2：3：1。

進一步地，S2中所述復合酶制劑用量為葛仙米粉末重量的0.5-1％。

進一步地，S3中乙醇的體積濃度為55-65％。

進一步地，S4中所述氯仿-正丁醇溶液中氯仿、正丁醇的體積比為4：1。

進一步地，S4中氯仿-正丁醇溶液的加入量為葛仙米粗多糖溶液體積的25-30％。

進一步地，S4中乙醇的體積濃度為75-100％。

進一步地，S4中飽和氯化鈉溶液和乙醇的加入量分別為濃縮液體積的?0.05-0.1倍、3-5倍。

本發(fā)明的有益效果：