[發明專利]一種用于減鹽醬油中耐鹽乳酸菌的檢測方法

在審

• 申請號: 202111598429.1
• 申請日: 2021-12-24
• 公開（公告）號: CN114015743A
• 公開（公告）日: 2022-02-08
• 發明（設計）人: 勇倩倩;劉進昌;劉瑋潔;史曉萌;張善亭
• 申請（專利權）人: 煙臺欣和企業食品有限公司
• 主分類號: C12Q1/04
• 分類號: C12Q1/04
• 代理公司: 北京中創博騰知識產權代理事務所(普通合伙) 11636
• 代理人: 李艷艷

本發明涉及一種用于減鹽醬油中耐鹽乳酸菌的檢測方法，包括如下步驟：葡萄糖、蛋白胨、牛肉膏、酵母膏、氯化鈉、產氣促進因子、醋酸鈉、檸檬酸二銨、吐溫80、硫酸鎂、硫酸錳和水混合，并加入pH緩沖劑調整pH值在5.0?6.5，然后分裝至10mL的試管中，加杜氏小導管，升溫滅菌，得到培養基；待測樣品采用無菌7.5％氯化鈉鹽水進行梯度稀釋，接種1mL至上述培養基中后，然后制造厭氧環境，完成接種；在36±1℃下培養，觀察，根據杜氏小導管中的產氣量和試管中產氣特征來確定是否含有耐鹽乳桿菌。所述檢測方法可以方便的檢測減鹽醬油中是否存在耐鹽乳酸菌，醬油樣品是否存在漲瓶滲漏風險，能夠控制和保證減鹽醬油產品質量。

技術領域

本發明涉及一種用于減鹽醬油中耐鹽乳酸菌的檢測方法，屬于乳酸菌檢測技術領域。

背景技術

醬油是人們日常生活中常用的調味品，健康減鹽是食品工業發展的必經之路，減鹽醬油的市場也逐漸壯大。目前減鹽醬油的鹽分含量通常在12％左右，有些減鹽醬油的鹽含量甚至能夠低到10％以下，由此也出現了一批在減鹽醬油特定環境中存活繁殖的乳酸菌，例如典型代表菌株lactobacillus halophilus和loigolactobacillus rennini，該類微生物能夠引起減鹽醬油的酸敗、產氣，但是不會引起普通醬油(通常鹽含量≥15％)的異常，目前針對該類微生物沒有特別的檢測方法。

CN101348826中提到了醬油等調味品中產氣菌的檢測方法，但是主要分析的微生物是一類芽孢菌，本發明所述的產氣菌指能夠引起減鹽醬油(鹽含量≤12％)脹氣、滲漏的一類耐鹽乳桿菌。CN108841914A中提到了一種用于調味品的檢測方法及用于培養產氣乳桿菌的培養基，但培養基中沒有一定鹽環境，且整體培養時間需要120±2h，培養時間較長。

現有的行業技術一般是以MRS培養基做為乳酸菌的檢測方法，本發明研究人員在減鹽醬油中發現了能夠引起減鹽醬油產氣酸敗的特殊乳酸菌，例如lactobacillushalophilus和loigolactobacillus rennini，該類乳酸菌在普通MRS平板上難以生長，在調味品的其他領域也未見對該類微生物的檢測進行研究報道，因此，本發明針對該類微生物進行了檢測方法的開發，為減鹽醬油產品中該類微生物的檢測和防治提供了基礎。

發明內容

本發明針對現有技術存在的不足，提供一種用于減鹽醬油中耐鹽乳酸菌的檢測方法，所述檢測方法可以實現減鹽醬油中耐鹽乳酸菌lactobacillus halophilus和loigolactobacillus rennini的檢測，可以方便的檢測減鹽醬油中是否存在耐鹽乳酸菌，減鹽醬油樣品是否存在漲瓶滲漏風險，能夠控制和保證減鹽醬油產品質量。

本發明解決上述技術問題的技術方案如下：一種用于減鹽醬油中耐鹽乳酸菌的檢測方法，所述的檢測方法包括如下步驟：

(1)配制培養基：葡萄糖、蛋白胨、牛肉膏、酵母膏、氯化鈉、產氣促進因子、醋酸鈉、吐溫、硫酸鎂、硫酸錳和水混合，并加入pH緩沖劑調整pH值在5.0-6.5，然后分裝至10mL的試管中，加杜氏小導管，升溫滅菌，得到培養基；

(2)待測樣品采用無菌7.5％氯化鈉鹽水進行梯度稀釋，接種1mL至上述培養基中后，然后制造厭氧環境，完成接種；

(3)將接種后的培養基放置在36±1℃下培養，觀察，根據杜氏小導管中的產氣量和試管中產氣特征來確定是否含有耐鹽乳桿菌。

優選的，按照重量份數計，所述葡萄糖10-30份，蛋白胨5-15份，牛肉膏5-15份，酵母膏1-10份，氯化鈉75-120份，產氣促進因子2-10份，醋酸鈉1-10份，吐溫800.1-5份、硫酸鎂0.1-5份、硫酸錳0.1-5份、pH緩沖劑2-10份，水800-1200份。

優選的，所述的產氣促進因子為谷氨酸、精氨酸、亮氨酸和賴氨酸中的一種或幾種組合。

優選的，所述的pH緩沖劑為磷酸氫二鉀和檸檬酸二銨中的一種或兩種組合。