[發明專利]CD44抗體、嵌合抗原受體及其應用

有效

• 申請號: 202111597421.3
• 申請日: 2021-12-24
• 公開（公告）號: CN114316049B
• 公開（公告）日: 2022-08-09
• 發明（設計）人: 張偉;翟優;李冠璋;江濤
• 申請（專利權）人: 北京市神經外科研究所
• 主分類號: C07K16/28
• 分類號: C07K16/28;C07K19/00;C12N15/13;C12N15/62;C12N5/10;A61K39/00;A61P35/00
• 代理公司: 北京市中倫律師事務所 11410
• 代理人: 信建

本發明涉及生物醫學技術領域，具體而言，涉及CD44抗體、嵌合抗原受體及其應用。本發明所提供CD44抗體或其抗原結合片段對CD44具有較好的親和力和特異性，且含有CD44抗體片段的嵌合抗原受體具有優秀的抗腫瘤效果。

技術領域

本發明涉及生物醫學技術領域，具體而言，涉及CD44抗體、嵌合抗原受體及其應用。

背景技術

嵌合抗原受體(Chimeric antigen receptor，CAR)是人工合成的T細胞受體，由抗原結合結構域、跨膜結構域和胞內信號傳導結構域組成。抗原結合結構域位于T細胞膜外，包括單鏈抗體或配體，用于特異性地結合靶抗原。胞內信號傳導結構域位于T細胞膜內，用于向T細胞內傳導信號以刺激T細胞產生免疫反應。

CAR-T能夠特異性識別腫瘤細胞依賴于CAR分子細胞外結構域的scFv。然而，目前對于實體腫瘤，尤其是腦膠質瘤的CAR-T治療，尚缺失理想的靶點選擇。實體腫瘤的異質性使得現有的表達嵌合抗原受體的T細胞不能識別腫瘤組織內低表達或不表達所選抗原的腫瘤細胞，從而整體上對腫瘤細胞的殺傷能力仍然較弱。然而，CAR-T在實體腫瘤中，特別是腦膠質瘤的應用尚沒有取得理想結果。

CD44為37.2kDa膜糖蛋白，共由20個高度保守的外顯子組成，中間由長短不一的內含子分隔。是透明質酸結合蛋白。生理上，該分子(1)介導淋巴細胞與毛細血管后小靜脈中的高柱狀內皮細胞結合，使淋巴細胞穿過血管壁回到淋巴組織；(2)參與淋巴細胞的激活過程；(3)與細胞外基質中的透明質酸、層粘連蛋白等基質分子結合；病理上，CD44在多種腫瘤細胞，特別是腫瘤干細胞上表達，表達水平高低與腫瘤侵襲能力直接相關。

利用抗CD44抗體構建嵌合抗原受體表達于T細胞表面，可使T細胞特異性殺傷CD44陽性的腫瘤細胞，通過用CD44嵌合抗原受體封閉T細胞自身的CD44可以有效避免相互殺傷。

發明內容

本發明的第一目的在于提供一種能夠特異性識別CD44的抗體或其抗原結合片段，其具有SEQ ID NO:1～3所示的重鏈互補決定區HCDR1、HCDR2和HCDR3，以及SEQ ID NO:4～6所示的輕鏈互補決定區LCDR1、LCDR2和LCDR3。

本發明的第二目的在于提供一種嵌合抗原受體，其胞外域具有如上所述scFv。

本發明的第三目的在于提供一種分離的核酸，其能夠表達如上所述抗體或其抗原結合片段，或如上所述的嵌合抗原受體。

本發明的第四目的在于提供含有如上所述核酸的載體。

本發明的第五目的在于提供宿主細胞，其含有如上所述的核酸或如上所述的載體，或表達有如上所述的嵌合抗原受體。

本發明的第六目的在于提供藥用組合物，其包含如上所述的宿主細胞。

本發明所提供CD44抗體或其抗原結合片段對CD44具有較好的親和力和特異性，且含有CD44抗體片段的嵌合抗原受體具有優秀的抗腫瘤效果。

附圖說明

為了更清楚地說明本發明具體實施方式或現有技術中的技術方案，下面將對具體實施方式或現有技術描述中所需要使用的附圖作簡單地介紹，顯而易見地，下面描述中的附圖是本發明的一些實施方式，對于本領域普通技術人員來講，在不付出創造性勞動的前提下，還可以根據這些附圖獲得其他的附圖。

圖1為本發明一個實施例所提供的SEQ ID NO:14所代表的scFv與腦膠質母細胞瘤細胞的流式細胞儀檢測結果圖；(standard為商品化CD44兔抗人單抗，proteintech公司，貨號60224)；

圖2為本發明一個實施例所提供的SEQ ID NO:14所代表的scFv與腦膠質母細胞瘤細胞的ELISA結果圖；standard為商品化CD44兔抗人單抗，proteintech公司，貨號60224)；