[發(fā)明專利]一種微流控芯片與數(shù)字化熒光定量PCR擴(kuò)增儀

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202111594061.1
• 申請(qǐng)日: 2021-12-23
• 公開（公告）號(hào): CN114308155B
• 公開（公告）日: 2023-05-12
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 楊志達(dá);陳雨非;宋佳;魏魯明;張子榕;楊曉丹;陳炳釗;云濤;鄧宇
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 廣東工業(yè)大學(xué)
• 主分類號(hào): B01L3/00
• 分類號(hào): B01L3/00;B01L3/02;C12N15/10;C12Q1/686
• 代理公司: 深圳市創(chuàng)富知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 44367
• 代理人: 高冰

1.一種微流控芯片，其特征在于，所述芯片由上層芯片與下層芯片組合而成，其中所述上層芯片設(shè)置有預(yù)混液的溶液進(jìn)樣口、細(xì)胞組織樣液進(jìn)樣口、洗滌溶液進(jìn)樣口、洗脫溶液進(jìn)樣口、第一廢液收集腔、油相收集腔、去油通道與混合流道；所述下層芯片設(shè)置有多通道液滴生成流道、第二廢液收集腔與液滴收集腔；所述預(yù)混液的溶液進(jìn)樣口的流道、所述細(xì)胞組織樣液進(jìn)樣口的流道、所述洗滌溶液進(jìn)樣口的流道、所述洗脫溶液進(jìn)樣口的流道分別與所述混合流道連通；所述混合流道的出口與所述去油通道連通，所述去油通道的流道出口與所述第一廢液收集腔的流道連通，所述油相收集腔連通于所述第一廢液收集腔與所述去油通道的流道出口之間；所述多通道液滴生成流道與所述廢液收集腔的流道連通，所述多通道液滴生成流道的出口依次連接有所述第二廢液收集腔、所述液滴收集腔；

所述混合流道的截面為正反Z型首尾相連的結(jié)構(gòu)；所述多通道液滴生成流道設(shè)有八通道，為T型結(jié)構(gòu)；所述預(yù)混液的溶液進(jìn)樣口包括硅油、磁珠、裂解液混合樣液。

2.一種根據(jù)權(quán)利要求1所述的微流控芯片的應(yīng)用，其特征在于，將微流控芯片應(yīng)用于數(shù)字化熒光定量PCR擴(kuò)增儀。

3.一種使用如權(quán)利要求1所述的微流控芯片的數(shù)字化熒光定量PCR擴(kuò)增儀，其特征在于，具有微流控芯片，以及所述PCR擴(kuò)增儀包括熒光檢測(cè)光路系統(tǒng)、激光發(fā)生器、壓力泵與微流控芯片夾片；其中，所述熒光檢測(cè)光路系統(tǒng)由凸透鏡、濾光片、二向色鏡、硅光電倍增管組成。

4.一種如權(quán)利要求3所述的微流控芯片的數(shù)字化熒光定量PCR擴(kuò)增儀的擴(kuò)增方法，其特征在于，所述方法包括加入的樣品進(jìn)入預(yù)混液的溶液進(jìn)樣口，利用磁珠法核酸提取法實(shí)現(xiàn)細(xì)胞的裂解，并由磁珠吸附核酸分子，經(jīng)洗脫液洗脫磁珠提取，進(jìn)入后方去油通道，保證進(jìn)入液滴包裹區(qū)域時(shí)僅保留所需要的核酸片段；再進(jìn)入后多通道液滴生成流道，利用多通道液滴生成流道的T型結(jié)構(gòu)，連續(xù)相和分散相在T形口處匯聚，分散相逐漸進(jìn)入主干道，在連續(xù)相的剪切下，“斷裂”，形成液滴；所生成的液滴進(jìn)入最后方的液滴收集腔室內(nèi)；待液滴生成完畢后，PCR擴(kuò)增儀進(jìn)入恒溫?cái)U(kuò)增狀態(tài)，直至擴(kuò)增完畢，熒光檢測(cè)光路則在擴(kuò)增完畢后對(duì)液滴收集腔室內(nèi)的液滴進(jìn)行檢測(cè)，從而實(shí)現(xiàn)PCR由預(yù)處理至擴(kuò)增、檢測(cè)的全過(guò)程。