[發(fā)明專利]鑒別或輔助鑒別大豆油分含量的分子標記及其應用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 202111572504.7
• 申請日: 2021-12-21
• 公開（公告）號: CN114292941B
• 公開（公告）日: 2023-03-14
• 發(fā)明（設計）人: 楊春燕;史曉蕾;趙青松;劉路平;閆龍;楊永慶;張孟臣;魏玉;陳強;趙鑫
• 申請（專利權(quán)）人: 河北省農(nóng)林科學院糧油作物研究所
• 主分類號: C12Q1/6895
• 分類號: C12Q1/6895;C12N15/11
• 代理公司: 北京紀凱知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11245
• 代理人: 莫舒穎

1.檢測大豆基因組中SNP的多態(tài)性或基因型的物質(zhì)在A1-A3中的任一種應用，其特征在于，所述SNP為SEQ ID No.1第30位核苷酸，其核苷酸種類為A或G；

A1、在鑒定大豆油分含量中的應用；

A2、在制備鑒定大豆油分含量產(chǎn)品中的應用；

A3、在高油分大豆育種中的應用或在制備高油分大豆育種產(chǎn)品中的應用；

所述大豆屬于HJ117×Hobbit的RIL群體、HJ117×中黃13的RIL群體、HJ117×齊黃34的RIL群體或HJ117×徐豆16的RIL群體。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的應用，其特征在于：所述物質(zhì)為下述任一種：

D1）所述物質(zhì)含有擴增包括所述SNP在內(nèi)的大豆基因組DNA片段的PCR引物；

D2）所述物質(zhì)為含有D1）所述PCR引物的PCR試劑；

D3）所述物質(zhì)為含有D1）所述PCR引物或D2）所述PCR試劑的試劑盒；

D4）所述物質(zhì)含有D1）所述PCR引物和限制性內(nèi)切酶TaqI；

D5）所述物質(zhì)為含有D2）所述PCR試劑和限制性內(nèi)切酶TaqI的試劑。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的應用，其特征在于：所述PCR引物為擴增SEQ ID No.1所示DNA片段的引物對。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的應用，其特征在于：所述引物對由P1和P2組成；所述P1為SEQID No.2所示的單鏈DNA，所述P2為SEQ ID No.3所示的單鏈DNA。

5.檢測大豆基因組中權(quán)利要求1中所述的SNP的基因型的方法，其特征在于：為如下Ⅰ或Ⅱ：

Ⅰ、包括如下K1）和K2）：

K1）以待測大豆的基因組DNA為模板，采用權(quán)利要求3中所述的引物對進行PCR擴增得到PCR產(chǎn)物；

K2）檢測步驟K1）得到的PCR產(chǎn)物，根據(jù)所述PCR產(chǎn)物確定待測大豆所述SNP的基因型：

所述PCR產(chǎn)物對應SEQ ID No.1第30位的核苷酸只為G的所述待測大豆的基因型為GG；所述PCR產(chǎn)物對應SEQ ID No.1第30位的核苷酸只為A的所述待測大豆的基因型為AA；

Ⅱ、包括如下L1）和L2）：

L1）以待測大豆基因組DNA為模板，采用權(quán)利要求4中所述的P1和權(quán)利要求4中所述的P2組成的引物對進行PCR擴增得到PCR產(chǎn)物；

L2）下述L21）或L22）：

L21）以TaqI酶切步驟L1）所得的PCR產(chǎn)物，檢測酶切產(chǎn)物的大小，根據(jù)所述酶切產(chǎn)物的大小確定待測大豆所述SNP的基因型：

所述酶切產(chǎn)物只為251bp的DNA片段的所述待測大豆的基因型為GG；所述酶切產(chǎn)物只為224bp的DNA片段和27bp的DNA片段的所述待測大豆的基因型為AA；

L22）檢測步驟L1）得到的PCR產(chǎn)物的序列，根據(jù)所述序列確定待測大豆所述SNP的基因型：

所述PCR產(chǎn)物對應SEQ ID No.1第30位的核苷酸只為G的所述待測大豆的基因型為GG；所述PCR產(chǎn)物對應SEQ ID No.1第30位的核苷酸只為A的所述待測大豆的基因型為AA。

6.鑒定大豆油分含量的方法，其特征在于，以權(quán)利要求5的方法檢測待測大豆基因型，根據(jù)待測大豆的基因型鑒定大豆的油分含量；基因型為GG的待測大豆油分含量高于基因型為AA的待測大豆油分含量；

所述大豆屬于HJ117×Hobbit的RIL群體、HJ117×中黃13的RIL群體、HJ117×齊黃34的RIL群體或HJ117×徐豆16的RIL群體。

7.高油分大豆育種的方法，其特征在于：以權(quán)利要求5的方法檢測待測大豆基因型，選擇基因型為GG的大豆作為親本進行育種；

所述大豆屬于HJ117×Hobbit的RIL群體、HJ117×中黃13的RIL群體、HJ117×齊黃34的RIL群體或HJ117×徐豆16的RIL群體。