[發(fā)明專利]一種抗鮑曼不動(dòng)桿菌化合物stemphol的制備方法和應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202111570491.X
• 申請(qǐng)日: 2021-12-21
• 公開（公告）號(hào): CN114469908B
• 公開（公告）日: 2023-09-26
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 張長(zhǎng)生;張文軍;王璐;張麗萍;丁雪敏
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 中國科學(xué)院南海海洋研究所
• 主分類號(hào): A61K31/05
• 分類號(hào): A61K31/05;A61P31/04;C12P7/22;C12N1/14;C07C37/70;C07C39/08;C12R1/645
• 代理公司: 廣州科粵專利商標(biāo)代理有限公司 44001
• 代理人: 劉明星;朱聰聰

本發(fā)明公開了一種抗鮑曼不動(dòng)桿菌化合物stemphol的制備方法和應(yīng)用。化合物Stemphol在制備抗鮑曼不動(dòng)桿菌的藥物中的應(yīng)用。本發(fā)明從匐柄霉Wh2分離得到具有抗鮑曼不動(dòng)桿菌19606的化合物Stemphol，其在微克濃度(μg/mL)水平對(duì)鮑曼不動(dòng)桿菌19606具有良好的抑制活性，具有作為抗革蘭氏陰性菌的潛在用途。因此，本發(fā)明的化合物Stemphol可以用于制備抗革蘭氏陰性菌藥物。

技術(shù)領(lǐng)域：

本發(fā)明屬于工業(yè)微生物領(lǐng)域，具體涉及一種抗鮑曼不動(dòng)桿菌化合物stemphol的制備方法和應(yīng)用。

背景技術(shù)：

由于臨床上抗生素的廣泛使用，革蘭氏陰性菌耐藥現(xiàn)象加劇，院內(nèi)感染嚴(yán)重。同時(shí)因?yàn)楦锾m氏陰性菌含有細(xì)胞膜、含薄肽聚糖層的周質(zhì)和含脂多糖的外膜，大部分抗菌藥物無法穿過細(xì)胞膜發(fā)揮作用。

鮑曼不動(dòng)桿菌是一種革蘭氏陰性條件致病菌，可引起肺炎、泌尿系統(tǒng)感染、腦膜炎等嚴(yán)重疾病。2017年世界衛(wèi)生組織公布的最需抗生素的12種細(xì)菌中鮑曼不動(dòng)桿菌處于第一優(yōu)先級(jí)，且中國細(xì)菌耐藥監(jiān)測(cè)網(wǎng)2020年公布數(shù)據(jù)顯示鮑曼不動(dòng)桿菌占臨床耐藥菌株約8％，位于分離耐藥菌株第五位。

藥物治療是治療革蘭氏陰性菌的主要手段，因此抗菌藥物的挖掘仍是生物醫(yī)藥公司及科研機(jī)構(gòu)的研究熱點(diǎn)。紅樹林生態(tài)系統(tǒng)的特殊性及蘊(yùn)含微生物的多樣性使得紅樹林內(nèi)生真菌形成獨(dú)特的次級(jí)代謝產(chǎn)物合成途徑，為產(chǎn)生結(jié)構(gòu)獨(dú)特的小分子天然產(chǎn)物提供了可能，具有挖掘新型抗菌藥物的巨大潛力。

文獻(xiàn)[Shingo?Marumo,Hiroyuki?Hattori,Masato?Katayama.Stemphol?fromPleospora?herbarum?as?a?Self-Inhibitor.Agric.Bioi.Chem.,1985,49(5),1521-1522]公開了從枯葉格孢腔菌中制備化合物Stemphol的方法以及其自我抑制功能。

發(fā)明內(nèi)容：

本發(fā)明的第一個(gè)目的是提供化合物Stemphol(2-丁基，5-戊基間二苯酚)的新用途，即化合物Stemphol在制備抗鮑曼不動(dòng)桿菌的藥物中的應(yīng)用。

本發(fā)明的第二個(gè)目的是一種抗鮑曼不動(dòng)桿菌的藥物，其含有化合物Stemphol作為活性成分。

本發(fā)明的第三個(gè)目的是提供一種化合物Stemphol的制備方法，所述的化合物Stemphol是從匐柄霉(Stemphylium?sp.)WH2的發(fā)酵培養(yǎng)物中分離得到的。

優(yōu)選，具體步驟為：

A、制備匐柄霉WH2的發(fā)酵培養(yǎng)物；

B、將發(fā)酵培養(yǎng)物用丙酮浸泡破碎浸取，浸取液經(jīng)蒸餾濃縮后得到浸膏，浸膏用Sephadex?LH-20凝膠柱層析，以氯仿/甲醇1:1v/v洗脫，將含有Stemphol的流份Fr.3進(jìn)一步用Sephadex?LH-20凝膠柱層析，以氯仿/甲醇1:1v/v洗脫，將含有Stemphol的亞流份Fr.3C利用高效液相色譜分離純化，得到化合物Stemphol。

優(yōu)選，所述的制備匐柄霉WH2的發(fā)酵培養(yǎng)物是將匐柄霉WH2接種到種子培養(yǎng)基中經(jīng)發(fā)酵獲得種子液，再將種子液接種到發(fā)酵培養(yǎng)基中，經(jīng)發(fā)酵獲得發(fā)酵培養(yǎng)物；

所述的種子培養(yǎng)基是含質(zhì)量分?jǐn)?shù)2％海鹽的PDB培養(yǎng)基；

所述的發(fā)酵培養(yǎng)基是每30ml的質(zhì)量分?jǐn)?shù)2％海鹽水中含有15g大米和15g燕麥。

所述的制備匐柄霉WH2的發(fā)酵培養(yǎng)物是將匐柄霉WH2接入種子培養(yǎng)基，28℃，200rpm，培養(yǎng)72h得種子液，將種子液接入到發(fā)酵培養(yǎng)基中，25℃，靜置培養(yǎng)32d，得到發(fā)酵培養(yǎng)物。

本發(fā)明的第四個(gè)目的匐柄霉WH2在制備化合物Stemphol中的應(yīng)用。