[發明專利]一種基于甲基轉移酶核酸適配體生物納米探針檢測DNA甲基化的方法

在審

• 申請號: 202111549486.0
• 申請日: 2021-12-17
• 公開（公告）號: CN114410748A
• 公開（公告）日: 2022-04-29
• 發明（設計）人: 逯嶺松;劉蓓;馬宵;周建平
• 申請（專利權）人: 杭州市第一人民醫院
• 主分類號: C12Q1/682
• 分類號: C12Q1/682;C12Q1/48;C12Q1/54;C12Q1/40
• 代理公司: 杭州橙知果專利代理事務所(特殊普通合伙) 33261
• 代理人: 范琪美

1.一種基于甲基轉移酶核酸適配體生物納米探針檢測DNA甲基化的方法,其特征在于，包括以下步驟：

步驟一：利用SELEX技術篩選甲基轉移酶適配體；

步驟二：用原子力顯微鏡和熒光顯微鏡分析篩選的適配體與甲基轉移酶的作用；

步驟三：設計與適配體互補的探針；

步驟四：通過一步溶劑熱法合成Au@Fe3O4NPs-rGO納米復合粒子；

步驟五：用透射電鏡、掃描電鏡和UV-VIS對Au@Fe3O4NPs-rGO納米復合粒子進行表征；

步驟六：通過Au@Fe3O4NPs-rGO納米復合粒子固定探針和蔗糖酶，制備金標蔗糖酶-探針。

步驟七：構建生物傳感界面；

步驟八：通過血糖儀檢測甲基轉移酶，將樣品放置在放置板上，并通過固定機構將樣品固定在放置板上，然后通過驅動機構將拉動放置板，將樣品移動到測定模塊正下方，啟動血糖儀進行檢測。

2.根據權利要求1所述的一種基于甲基轉移酶核酸適配體生物納米探針檢測DNA甲基化的方法，其特征在于：所述固定機構包括、設于所述放置板上的多個吸盤、氣囊及連接所述氣囊與吸盤的連接管，所述放置板設有通氣腔和通氣孔；按壓氣囊可將通氣腔內的空氣從通氣孔處排出，然后將樣品放置在吸盤上，松開氣囊，將在吸盤處形成負壓，將樣品固定在吸盤上。

3.根據權利要求1所述的一種基于甲基轉移酶核酸適配體生物納米探針檢測DNA甲基化的方法，其特征在于：所述驅動機構包括限位板、轉軸、設于所述轉軸上的繞線輪、限位套筒、設于所述限位套筒上的滾柱、連接線及定位組件，所述連接線一端固定在繞線輪上，另一端固定在放置板上；轉動轉軸，帶動繞線輪轉動纏繞連接線，進而拉動放置板相對限位板滑動。

4.根據權利要求3所述的一種基于甲基轉移酶核酸適配體生物納米探針檢測DNA甲基化的方法，其特征在于：所述定位組件包括設于所述轉軸上的定位孔、設于所述定位孔內的彈性件、設于所述彈性件端部上的頂桿、設于所述頂桿上的滾珠及套筒，所述套筒設有與滾珠配合的定位槽。