[發明專利]一種便于使用的組織工程角膜上皮植片及其制備、應用方法

在審

• 申請號: 202111548044.4
• 申請日: 2021-12-16
• 公開（公告）號: CN114917058A
• 公開（公告）日: 2022-08-19
• 發明（設計）人: 梁慶豐;王樂瀅;韋振宇;張子俊;陳前坤
• 申請（專利權）人: 首都醫科大學附屬北京同仁醫院
• 主分類號: A61F2/14
• 分類號: A61F2/14;A61L27/38;A61L27/36
• 代理公司: 北京高航知識產權代理有限公司 11530
• 代理人: 劉艷玲

本發明提供一種便于使用的組織工程角膜上皮植片，屬于眼科治療材料領域，所述植片包括支架，以及與所述支架凹面貼合的角膜緣上皮干細胞，以及貼合在所述角膜緣上皮干細胞上的羊膜，以及貼合在所述羊膜上的角膜緣微環境細胞。本發明可使患者無需手術，僅通過簡單的類似佩戴隱形接觸鏡的方式，將植片放置于角膜上即可實現角膜緣上皮及其微環境的移植重建，從而治療角膜緣干細胞缺乏，促進缺損的角膜上皮愈合，減少角膜組織的瘢痕形成。

技術領域

本發明涉及醫療用品領域，具體涉及眼科治療材料，尤其涉及一種便于使用的組織工程角膜上皮植片。

背景技術

角膜上皮位于角膜最前端，是一類分層的、非角化的鱗狀上皮組織，具有4-6層細胞，約占整個角膜厚度的10％，是角膜抵御外界損傷的重要防線，也對維持角膜的透明起到至關重要的作用，角膜上皮受損后，可能會造成各種角膜疾病，甚至導致失明。

角膜緣干細胞缺乏癥是致盲性疾病，并發癥有角膜上皮缺損甚至穿孔，角膜緣干細胞缺乏的病因多樣，是多種眼表疾病的終末結局，患者可因角膜上皮遷延不愈、持續的炎癥反應和組織破壞導致角膜穿孔、視力下降甚至視力喪失，嚴重影響患者的生活質量。

角膜緣干細胞移植是治療角膜緣干細胞最為有效的治療手段，但受限于傳統思想，捐獻角膜的數量十分有限，遠遠不能滿足臨床需求，導致患者等待時間長、延誤治療。

為解決此問題，組織工程角膜上皮是一個有效的方案，現已有多種組織工程技術構建角膜上皮，但目前還存在許多不足：首先，只單純移植角膜緣上皮干細胞，未對角膜緣上皮干細胞生存的微環境進行重建，移植后的干細胞難以在患者的眼表持續增殖更新，容易導致移植失敗；其次，移植方式操作復雜、耗時長，對手術設備的要求較高，需在設備齊全的醫院才能夠進行移植手術；最后，既往組織工程角膜上皮在移植過程中需要縫合，不可避免地對眼部組織造成損傷。

發明內容

鑒于目前角膜緣干細胞移植手段的匱乏，以及現有移植方式治療效果有限、創傷較大、操作復雜，本發明提供一種使用方便、可多次治療的新型組織工程角膜上皮植片，同時提供其制備方法。

本發明的目的采用以下技術方案來實現：

一種便于使用的組織工程角膜上皮植片，包括支架，以及與所述支架凹面貼合的角膜緣上皮干細胞，以及貼合在所述角膜緣上皮干細胞上的羊膜，以及貼合在所述羊膜上的角膜緣微環境細胞。

優選的，所述支架為生物支架或合成支架。

優選的，所述支架為角膜接觸鏡。

優選的，所述支架的直徑為14.0-14.5mm，凹面曲率半徑為8.4-8.8mm。

本發明的目的之二在于提供一種前述的組織工程角膜上皮植片的制備方法，所述制備方法包括以下步驟：

S1、從捐獻眼或患者對側健眼獲得一定大小的角膜緣組織，通過消化法將角膜緣組織的上皮層與基質層分開，并進一步消化分離分別得到角膜緣上皮干細胞和角膜緣微環境細胞；

S2、將所述角膜緣上皮干細胞培養于所述支架的凹面，待所述角膜緣上皮干細胞增殖至鋪滿支架凹面，制備得到組織工程角膜上皮；

S3、將所述角膜緣微環境細胞培養于所述羊膜表面，待所述角膜緣微環境細胞增殖至能夠鋪滿所述羊膜全部表面，得到組織工程角膜緣微環境；

S4、將所述組織工程角膜緣微環境的羊膜面貼附在所述組織工程角膜上皮的凹面，獲得所述組織工程角膜上皮植片。

本發明的目的之三在于提供一種前述的組織工程角膜上皮植片的使用方法，所述使用方法包括以下步驟：

(1)清洗雙手；

(2)取出保存于干細胞培養基中的組織工程角膜上皮植片，凹面向上置于右手食指上；