[發(fā)明專利]檢測(cè)牡荊素的方法

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202111528292.2
• 申請(qǐng)日: 2021-12-14
• 公開（公告）號(hào): CN114235766A
• 公開（公告）日: 2022-03-25
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 國(guó)錦琳;沈才洪;李陽(yáng);王松濤;范雨;黃張君;楊晶艷;余松柏
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 瀘州品創(chuàng)科技有限公司;成都中醫(yī)藥大學(xué)
• 主分類號(hào): G01N21/64
• 分類號(hào): G01N21/64;G01N1/38
• 代理公司: 成都虹橋?qū)＠聞?wù)所(普通合伙) 51124
• 代理人: 許澤偉

1.檢測(cè)牡荊素的方法，其特征在于：包括以下步驟：

(1)合成NCPDs：以超支化聚乙烯亞胺和L-蘇氨酸為原料，通過(guò)水熱法制備NCPDs，NCPDs為非共軛聚合物點(diǎn)；

(2)標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制：配置不同濃度的牡荊素標(biāo)準(zhǔn)溶液，測(cè)定各濃度溶液的熒光強(qiáng)度，以牡荊素濃度為橫坐標(biāo)，F(xiàn)₀/F為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線；其中F₀表示不加牡荊素標(biāo)準(zhǔn)溶液的NCPDs熒光強(qiáng)度，F(xiàn)表示加入一定濃度的牡荊素標(biāo)準(zhǔn)溶液后的NCPDs熒光強(qiáng)度；

(3)熒光測(cè)定：測(cè)定未添加樣品溶液的NCPDs溶液熒光強(qiáng)度F₀和加入樣品溶液的NCPDs溶液熒光強(qiáng)度F，將F₀/F代入標(biāo)準(zhǔn)曲線中定量分析。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的檢測(cè)牡荊素的方法，其特征在于：步驟(1)中，所述超支化聚乙烯亞胺分子量為Mw＝22000～28000Da。

3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的檢測(cè)牡荊素的方法，其特征在于：步驟(1)中，所述NCPDs是將超支化聚乙烯亞胺溶于PBS溶液中，攪拌均勻后，加入L-蘇氨酸后進(jìn)行水熱反應(yīng)，反應(yīng)后冷卻，然后透析純化、冷凍干燥后，即得。

4.根據(jù)權(quán)利要求1～3任一項(xiàng)所述的檢測(cè)牡荊素的方法，其特征在于：步驟(1)中，所述超支化聚乙烯亞胺和L-蘇氨酸的質(zhì)量比為1：5～8；優(yōu)選地，所述超支化聚乙烯亞胺和L-蘇氨酸的質(zhì)量比為1：6。

5.根據(jù)權(quán)利要求1～4任一項(xiàng)所述的檢測(cè)牡荊素的方法，其特征在于：步驟(1)中，所述水熱反應(yīng)中，反應(yīng)溫度為120～180℃，反應(yīng)時(shí)間為5～8h；優(yōu)選地，反應(yīng)溫度為150℃，反應(yīng)時(shí)間為6h。

6.根據(jù)權(quán)利要求1～5任一項(xiàng)所述的檢測(cè)牡荊素的方法，其特征在于：步驟(1)中，所述水熱反應(yīng)環(huán)境為密閉高壓條件，壓力為0.01～0.05MPa。

7.根據(jù)權(quán)利要求1～6任一項(xiàng)所述的檢測(cè)牡荊素的方法，其特征在于：步驟(1)中，所述透析的分子量截止為3500Da，純化時(shí)間為1～2天。

8.根據(jù)權(quán)利要求1～7任一項(xiàng)所述的檢測(cè)牡荊素的方法，其特征在于：步驟(2)中，所述牡荊素標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度為0～40μg/mL。

9.根據(jù)權(quán)利要求1～8任一項(xiàng)所述的檢測(cè)牡荊素的方法，其特征在于：步驟(3)中，所述NCPDs加入量為1.80～1.99mL，樣品溶液加入量為10～200μL；優(yōu)選地，所述NCPDs加入量為1.99mL，樣品溶液加入量為10μL。

10.權(quán)利要求1～9任一項(xiàng)所述的檢測(cè)牡荊素的方法在綠豆大曲生產(chǎn)現(xiàn)場(chǎng)中的應(yīng)用。