[發明專利]抗菌肽coleoptericin及其原核表達方法與應用

在審

• 申請號: 202111522903.2
• 申請日: 2021-12-13
• 公開（公告）號: CN116262782A
• 公開（公告）日: 2023-06-16
• 發明（設計）人: 朱要宏;王雪;李淑賢;杜孟澤;王九峰
• 申請（專利權）人: 中國農業大學
• 主分類號: C07K14/435
• 分類號: C07K14/435;C12N15/12;C12N15/70;C12N1/21;C07K1/22;A61K38/17;A61P31/04;A61P15/14;C12R1/19
• 代理公司: 北京路浩知識產權代理有限公司 11002
• 代理人: 黃爽

1.抗菌肽coleoptericin，其特征在于，所述抗菌肽包含如下的氨基酸序列或由其組成：

i)如SEQ?ID?NO:3所示的氨基酸序列；或

ii)在i)的N端和/或C端連接標簽得到的氨基酸序列。

2.編碼權利要求1所述抗菌肽的核酸分子。

3.含有權利要求2所述核酸分子的生物材料，其特征在于，所述生物材料為重組DNA、表達盒、轉座子、質粒載體、病毒載體、工程菌或轉基因細胞系。

4.抗菌肽coleoptericin的原核表達的方法，其特征在于，包括以下步驟：

(1)通過RACE?PCR方法從大麥蟲中擴增得到抗菌肽coleoptericin的編碼基因；

(2)構建重組載體：將所述編碼基因插入到原核表達載體中，構建得到包含所述編碼基因的重組載體；

(3)表達抗菌肽coleoptericin：將重組載體轉化至大腸桿菌，利用IPTG誘導后收集包含抗菌肽coleoptericin的細菌；

其中，抗菌肽coleoptericin的定義同權利要求1中所述。

5.根據權利要求4所述的方法，其特征在于，所述方法還包括采用PBS處理細菌懸液，超聲破碎后離心并收上清液；采用GST柱親和層析和Superdex30凝膠過濾層析純化所述上清液，獲得純化的抗菌肽coleoptericin。

6.權利要求1所述抗菌肽的以下任一應用：

1)用于抑制細菌；

2)用于制備抑菌劑；

3)用于制備防腐劑；

4)用于制備抗菌藥物。

7.根據權利要求6所述的應用，其特征在于，所述細菌包括肺炎克雷伯菌(KlebsiellaPneumoniae)、大腸桿菌(Escherichia?coli)、金黃色葡萄球菌(Staphylococcus?aureus)、溶血葡萄球菌(Staphylococcus?haemolyticus)。

8.抗菌藥物，其特征在于，有效成分為權利要求1所述的抗菌肽。

9.抑菌劑或防腐劑，其特征在于，有效成分為權利要求1所述的抗菌肽。

10.權利要求1所述抗菌肽在制備用于治療或減輕由肺炎克雷伯菌導致的乳腺炎的藥物中的應用。