[發明專利]二次兩級切向流分離純化和濃縮外泌體的超濾裝置及方法

在審

• 申請號: 202111520737.2
• 申請日: 2021-12-13
• 公開（公告）號: CN114471163A
• 公開（公告）日: 2022-05-13
• 發明（設計）人: 何加銘;李思;楊茗予
• 申請（專利權）人: 寧波甬恒瑤瑤智能科技有限公司
• 主分類號: B01D61/18
• 分類號: B01D61/18;B01D61/14;C12M1/12
• 代理公司: 寧波甬致專利代理有限公司 33228
• 代理人: 李迎春

1.一種二次兩級切向流分離純化和濃縮外泌體的超濾裝置，其特征在于，包括通過管路(3)依次連通的第一級切向流超濾系統(1)、第一蠕動泵(4)以及第二級切向流超濾系統(2)，所述第一蠕動泵(4)用于驅動所述第一級切向流超濾系統(1)內部的液體流至所述第二級切向流超濾系統(2)；

且所述第一級切向流超濾系統(1)內設置有第一過濾膜(11)，所述第二級切向流超濾系統(2)內設置有第二過濾膜(21)，所述第一過濾膜(11)與所述第二過濾膜(21)通過所述第一蠕動泵(4)相連通；所述第二過濾膜(21)的過濾孔孔徑小于所述第一過濾膜(11)的過濾孔孔徑。

2.根據權利要求1所述的二次兩級切向流分離純化和濃縮外泌體的超濾裝置，其特征在于，所述第一過濾膜(11)的過濾孔孔徑大于等于0.18μm，所述第二過濾膜(21)的過濾孔孔徑小于等于0.03μm；且所述的第一過濾膜以及第二過濾膜均為盒式平板膜。

3.根據權利要求1所述的二次兩級切向流分離純化和濃縮外泌體的超濾裝置，其特征在于，所述第一級切向流超濾系統(1)內設置有一過濾液容器(12)，所述第二級切向流超濾系統(2)內設置有一富集液容器(22)，且所述過濾液容器(12)與所述第一過濾膜(11)下游通過所述管路(3)連通，所述富集液容器(22)與所述第二過濾膜(21)的上游和下游通過所述管路(3)連通，使得液體在所述超濾裝置流動時，通過所述第一過濾膜(11)的液體流入所述過濾液容器(12)中，未通過所述第二過濾膜(21)的液體流入富集液容器(22)中。

4.根據權利要求3所述的二次兩級切向流分離純化和濃縮外泌體的超濾裝置，其特征在于，所述富集液容器(22)與所述第二過濾膜之間設置有一單向閥(6)和一個循環泵(5)，且該單向閥(6)的流向為從所述富集液容器(22)至所述第二過濾膜，所述循環泵(5)用于驅動所述第二級切向流超濾系統(2)內部的液體循環流動。

5.根據權利要求4所述的二次兩級切向流分離純化和濃縮外泌體的超濾裝置，其特征在于，所述第二過濾膜(21)出口端與一回收容器(8)相連通，所述回收容器(8)用于回收經過所述循環泵(5)循環結束后通過所述第二過濾膜(21)的液體。

6.根據權利要求1所述的二次兩級切向流分離純化和濃縮外泌體的超濾裝置，其特征在于，所述第一過濾膜(11)的進口端的所述管路(3)與一待提取液容器(7)相連通；使得液體在所述超濾裝置流動時，未通過所述第一過濾膜(11)的液體流入所述待提取液容器(7)中。

7.根據權利要求6所述的二次兩級切向流分離純化和濃縮外泌體的超濾裝置，其特征在于，所述第一級切向流超濾系統(1)內設置有一第二蠕動泵(9)，且所述第二蠕動泵的進口與所述待提取液容器(7)相連通，所述第二蠕動泵的出口與所述第一過濾膜(11)的進口端相連通；所述第二蠕動泵用于驅動所述待提取液容器(7)內的液體流至所述第一級切向流超濾系統(1)。

8.一種二次兩級切向流分離純化和濃縮外泌體的超濾方法，其特征在于，采用權利要求1-7任一項超濾裝置進行超濾，所述超濾方法包括以下步驟：

S1：將含外泌體的待提取液通入至管路(3)中，所述待提取液流經第一級切向流超濾系統(1)的第一過濾膜進行初次過濾得到過濾液；所述第一過濾膜的過濾孔孔徑大于所述外泌體；

S2：步驟S1的過濾液流經第二級切向流超濾系統(2)的第二過濾膜進行再次過濾進行富集和濃縮，得到被第二過濾膜(21)過濾后的過濾液以及純化后的外泌體富集液；所述第二過濾膜(21)的過濾膜孔徑小于所述外泌體；

S3：將步驟S2中得到的外泌體富集液進行再次循環超濾，最終在第二級切向流超濾系統(2)內得到純化濃縮后的外泌體富集液。

9.根據權利要求8所述的二次兩級切向流分離純化和濃縮外泌體的超濾方法，其特征在于，所述步驟S1中，所述含外泌體的待提取液為細胞培養基上清液。

10.根據權利要求8所述的二次兩級切向流分離純化和濃縮外泌體的超濾方法，其特征在于，所述步驟S3中，循環超濾在所述第二級切向流超濾系統(2)內進行，具體為：在步驟S2處理后，通過將所述富集液通入至第二級切向流超濾系統(2)內進行再次超濾，且所述再次超濾的次數大于等于1次。