[發明專利]一種豬脾轉移因子的生產方法及產品

在審

• 申請號: 202111517773.3
• 申請日: 2021-12-13
• 公開（公告）號: CN116270738A
• 公開（公告）日: 2023-06-23
• 發明（設計）人: 杜新永;楊為強;劉爽;蓋春云;張得彥
• 申請（專利權）人: 青島潤達生物科技有限公司
• 主分類號: A61K35/26
• 分類號: A61K35/26;A61P37/02
• 代理公司: 青島華慧澤專利代理事務所(普通合伙) 37247
• 代理人: 馬千會

本發明屬于生物制品制備領域，涉及一種豬脾轉移因子的生產方法及產品。一種豬脾轉移因子的生產方法，包括：清洗、粉碎、凍融、酸沉、絮凝步驟；凍融一次后，使用生物酶酶解處理豬脾原料。本發明提供的豬脾轉移因子的生產方法，采用酶解法來代替傳統方法中的多次凍融，操作簡單，處理時間短，只需一次凍融，避免反復凍融造成的轉移因子產率低、不穩定，同時，采用酶解處理，得到的轉移因子產品生物活性更高。

技術領域

本發明屬于生物制品制備領域，涉及一種豬脾轉移因子的生產方法及產品。

背景技術

?轉移因子(transfer?factor，常簡寫為TF)?是存在于致敏淋巴細胞內與遲發型超敏反應有關的一類可透析小分子物質，可使供體的細胞免疫性轉移給受體正常的淋巴細胞，使其具有供體的細胞免疫性，為免疫調節劑。在人，畜，禽中都有應用。

現有技術的轉移因子制備方法普遍是將動物脾臟進行絞碎、破壞細胞結構使胞內轉移因子釋放到漿液中，再將漿液中的轉移因子進行分離精制最終得到轉移因子產品。該方法存在操作時間長，易污染，有效成分不穩定等缺點。其他破碎細胞的嘗試包括超聲法等，這些方法在成本，時間、生物活性上各有不足。

動物脾臟漿液成分復雜，因此動物TF不易分離純化；動物TF分子量一般在3～15KD，屬于小分子多肽，不含蛋白質。不同動物和不同抗原特異性TF的分子量、肽分子大小和氨基酸種類略有差別等。鑒于以上特點，轉移因子的質量較大程度上受制備方法和工藝的影響，選取合適的制備工藝對提高轉移因子的品質至關重要。

發明內容

為了彌補現有技術的不足，本發明提供一種豬脾轉移因子的生產方法，該方法采用酶法處理豬脾樣品，可以在較短的時間內高效完成樣本的裂解，所生產產品有良好的生物學效果。

本發明解決其技術問題采用的技術方案是：一種豬脾轉移因子的生產方法，包括：清洗、粉碎、凍融、絮凝步驟；其中，凍融一次后，使用酶酶解處理豬脾原料。

優選地，所述的酶為蛋白酶和/或半纖維素酶。

優選地，所述的酶為蛋白酶和β-甘露聚糖酶。

優選地，所述酶解處理豬脾原料的步驟中，每千克豬脾原料所需酶的用量是：6萬U的蛋白酶和5萬U的β-甘露聚糖酶。

優選地，所述的蛋白酶為酸性蛋白酶或堿性蛋白酶。

優選地，酸性蛋白酶的酶解條件為pH5.0，40℃，酶解8小時。

優選地，堿性蛋白酶的酶解條件為pH8.0，40℃，酶解8小時。

優選地，在酶解處理后還包括酸沉步驟，所述酸沉中使用濃鹽酸調節pH至?pH4.0。

優選地，所述絮凝步驟中使用0.2%的殼聚糖作為絮凝劑。

本發明還提供了使用上述方法制備的豬脾轉移因子產品。

本發明提供的豬脾轉移因子的生產方法，采用酶解法來代替傳統方法中的多次凍融，操作簡單，處理時間短，只需一次凍融，避免反復凍融造成的轉移因子產率低、不穩定，同時，采用酶解處理，得到的轉移因子產品生物活性更高。

具體實施方式

為了便于理解本發明，下面結合具體實施例，對本發明進行更詳細的說明。給出了本發明的較佳的實施例。但是，本發明可以以許多不同的形式來實現，并不限于本說明書所描述的實施例。相反地，提供這些實施例的目的是使對本發明公開內容的理解更加透徹全面。

本發明下述實施例中，使用的主要原料和試劑介紹如下：

豬脾臟：采購自申請人所在地的生豬養殖屠宰企業；有結果對比的實驗中盡量使用同一批次，至少為同一來源的豬脾臟；使用前保存于-20℃下。