[發(fā)明專利]可特異性識別氟苯尼考及氟苯尼考胺的核酸適配體及其應(yīng)用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 202111516822.1
• 申請日: 2021-12-07
• 公開（公告）號: CN114231534B
• 公開（公告）日: 2023-07-11
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 王向紅;劉若冰;史明慧;桑亞新;劉敏軒;崔琦琦
• 申請（專利權(quán)）人: 河北農(nóng)業(yè)大學(xué)
• 主分類號: C12N15/115
• 分類號: C12N15/115;G01N33/53;G01N33/58;G01N33/543;G01N21/31
• 代理公司: 北京風(fēng)雅頌專利代理有限公司 11403
• 代理人: 鮑勝如

本公開提供一種可特異性識別氟苯尼考及氟苯尼考胺的核酸適配體及其應(yīng)用，所述核酸適配體的序列如SEQ?ID?NO.1所示，或所述核酸適配體的序列如SEQ?ID?NO.2所示。該核酸適配體相比于蛋白抗體具有更高的親和特異性，且無免疫原性、能夠化學(xué)合成、分子量小且性質(zhì)穩(wěn)定、能夠特異性結(jié)合氟苯尼考及氟苯尼考胺，該核酸適配體以氟苯尼考及氟苯尼考胺為靶標(biāo)，可實(shí)現(xiàn)氟苯尼考及氟苯尼考胺定性和定量的快速檢測，成本低、特異性高且適用范圍廣，還可以基于該核酸適配體構(gòu)建各種用于檢測氟苯尼考和/或氟苯尼考胺的生物傳感器。

技術(shù)領(lǐng)域

本公開涉及生物技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及一種可特異性識別氟苯尼考及氟苯尼考胺的核酸適配體及其應(yīng)用。

背景技術(shù)

目前，對于氟苯尼考和氟苯尼考胺的檢測方法以免疫分析法和氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法為主；免疫分析法適用于現(xiàn)場檢測但抗體的制備需要實(shí)驗(yàn)動物，很難被重復(fù)生產(chǎn)；氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法可用于確證檢測，但前期處理過程復(fù)雜，需進(jìn)行衍生化處理。。

因此，亟需操作簡便且能夠高效、高靈敏度檢測氟苯尼考及氟苯尼考胺的檢測技術(shù)。

發(fā)明內(nèi)容

有鑒于此，本公開的目的在于提出一種可特異性識別氟苯尼考及氟苯尼考胺的核酸適配體及其應(yīng)用。

基于上述目的，本公開第一方面提供了一種可特異性識別氟苯尼考及氟苯尼考胺的核酸適配體，所述核酸適配體的序列如SEQ?ID?NO.1所示。

基于相同目的，本公開第二方面提供了一種可特異性識別氟苯尼考及氟苯尼考胺的核酸適配體，所述核酸適配體的序列如SEQ?ID?NO.2所示。

基于相同目的，本公開第三方面提供了一種可特異性識別氟苯尼考及氟苯尼考胺的核酸適配體，所述核酸適配體的序列與SEQ?ID?NO.1或SEQ?ID?NO.2所示的序列具有60％以上的同源性；

或，

所述核酸適配體的序列為SEQ?ID?NO.1或SEQ?ID?NO.2所示的序列的雜交序列；

或，

所述核酸適配體的序列為由SEQ?ID?NO.1或SEQ?ID?NO.2所示的序列轉(zhuǎn)錄的RNA序列。

基于相同目的，本公開第四方面提供了如本公開第一方面、第二方面或第三方面所述的可特異性識別氟苯尼考及氟苯尼考胺的核酸適配體在制備氟苯尼考和/或氟苯尼考胺檢測試劑盒或氟苯尼考和/或氟苯尼考胺分子探針中的應(yīng)用。

基于相同目的，本公開第五方面提供了應(yīng)用本公開第一方面、第二方面或第三方面所述的可特異性識別氟苯尼考及氟苯尼考胺的核酸適配體的氟苯尼考和/或氟苯尼考胺的檢測方法，所述方法包括：將核酸適配體與膠體金避光反應(yīng)30～35min，然后向反應(yīng)后的體系中加入待測樣品，混勻，于37～40℃避光反應(yīng)60～70min后測定溶液的吸光度值。

基于相同目的，本公開第六方面提供了一種用于檢測氟苯尼考和/或氟苯尼考胺的試劑盒，所述試劑盒包括本公開第一方面、第二方面或第三方面所述的可特異性識別氟苯尼考及氟苯尼考胺的核酸適配體。

從上面所述可以看出，本公開提供的可特異性識別氟苯尼考及氟苯尼考胺的核酸適配體及其應(yīng)用，該核酸適配體相比于蛋白抗體具有更高的親和特異性，且無免疫原性、能夠化學(xué)合成、分子量小且性質(zhì)穩(wěn)定、能夠特異性結(jié)合氟苯尼考及氟苯尼考胺，該核酸適配體以氟苯尼考及氟苯尼考胺為靶標(biāo)，可實(shí)現(xiàn)氟苯尼考及其代謝物氟苯尼考胺定性和定量的快速檢測，成本低、特異性高且適用范圍廣，還可以基于該核酸適配體構(gòu)建各種用于檢測氟苯尼考和/或氟苯尼考胺的生物傳感器；該核酸適配體作為抗生素識別分子為食品加工、食品管理及營養(yǎng)規(guī)劃等領(lǐng)域中的重要工具。

附圖說明