[發(fā)明專利]一種熒光假單胞菌的固定化裝置及方法在審
| 申請?zhí)枺?/td> | 202111507834.8 | 申請日: | 2021-12-10 |
| 公開(公告)號: | CN114164080A | 公開(公告)日: | 2022-03-11 |
| 發(fā)明(設(shè)計)人: | 涂強(qiáng);張友明;武玉俠 | 申請(專利權(quán))人: | 德州邁科生物技術(shù)有限公司 |
| 主分類號: | C12M1/00 | 分類號: | C12M1/00;C12N11/10;C12N11/04;C12R1/39 |
| 代理公司: | 北京高沃律師事務(wù)所 11569 | 代理人: | 張夢澤 |
| 地址: | 251200 山東省德州市禹城市市中街道辦*** | 國省代碼: | 山東;37 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關(guān)鍵詞: | 一種 熒光 假單胞菌 固定 化裝 方法 | ||
本發(fā)明提供了一種熒光假單胞菌的固定化裝置及方法,屬于農(nóng)業(yè)生物技術(shù)領(lǐng)域,所述固定化裝置包括顆粒形成槽,所述顆粒形成槽的頂部設(shè)置有進(jìn)料組件;所述進(jìn)料組件的底部固定有多個滴頭。熒光假單胞菌菌液與滅菌的海藻酸鈉水溶液混合,得到混合料,混合料通過本發(fā)明的滴頭后形成液滴,液滴滴入含有乳酸鈣水溶液的顆粒形成槽中硬化成型,得到固化凝膠。本發(fā)明通過多個滴頭的集成,能夠提高熒光假單胞菌固定化微球的制備效率,相比常規(guī)的采用注射器擠壓法制備,制備量能夠顯著提高,易于工業(yè)化普及。
技術(shù)領(lǐng)域
本發(fā)明涉及農(nóng)業(yè)生物技術(shù)領(lǐng)域,尤其涉及一種熒光假單胞菌的固定化裝置及方法。
背景技術(shù)
熒光假單胞菌(Pseudomonas protegens)屬革蘭氏陰性桿狀細(xì)菌,常見于植物根圍和土壤中,是一種植物根際促生細(xì)菌,具有繁殖速度快、適應(yīng)能力強(qiáng)、易于人工培養(yǎng)、制劑穩(wěn)定、施用方便、不污染環(huán)境、防治多種植物病害等優(yōu)點。
固定化細(xì)胞是指固定在水不溶性載體上,且能在一定的空間范圍進(jìn)行生命活動的細(xì)胞?,F(xiàn)有的固定化技術(shù)包括微膠囊包埋、載體吸附等方法。通過細(xì)胞的固定化可以減少外界不良環(huán)境對生物體的影響,使其盡可能保持旺盛的代謝活性,且微生物活體細(xì)胞能被重復(fù)和連續(xù)使用。細(xì)胞固定化技術(shù)在生物技術(shù)領(lǐng)域已經(jīng)顯示出巨大的應(yīng)用潛力。在未來,具有制備工藝簡便、穩(wěn)定性強(qiáng)及可連續(xù)操作的細(xì)胞固定化技術(shù)將在生物發(fā)酵領(lǐng)域內(nèi)得到更廣泛應(yīng)用。在已有的固定化技術(shù)中,海藻酸鈉由于在細(xì)胞固定化過程中具有對生物無毒性、傳質(zhì)性能較好和具有良好的生物相容性等特點,已被廣泛采用。
現(xiàn)有的熒光假單胞菌的固定化常用注射器擠壓法,主要區(qū)別是固定化過程中原材料的選擇略有不同。例如,中國專利CN110358709A公開了一種熒光假單胞菌微膠囊劑及其制備方法和應(yīng)用,使用的材料為氧化海藻酸鈉和明膠與淀粉;中國專利CN105861365A公開了一株假單胞菌LD23及其固定化微球的制備,使用的材料為海藻酸鈉與活性炭。以上兩種方法均為注射器擠壓法,制備量較小,難以在實際生產(chǎn)中推廣應(yīng)用。
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種熒光假單胞菌的固定化裝置及方法,本發(fā)明的固定化裝置和方法能夠大量制備熒光假單胞菌固定化微球。
為了實現(xiàn)上述發(fā)明目的,本發(fā)明提供以下技術(shù)方案:
本發(fā)明提供了一種熒光假單胞菌的固定化裝置,包括顆粒形成槽1,所述顆粒形成槽1的頂部設(shè)置有進(jìn)料組件2;所述進(jìn)料組件2的底部固定有多個滴頭。
優(yōu)選的,所述固定化裝置還包括收集槽3;所述收集槽3設(shè)置于所述顆粒形成槽1的下方;所述收集槽3通過管道和所述顆粒形成槽1連通。
優(yōu)選的,在所述收集槽3的頂部設(shè)置有水平滑軌6;所述水平滑軌6與所述進(jìn)料組件2平行設(shè)置;在所述水平滑軌6上設(shè)置有與水平滑軌6適配的水平滑軌網(wǎng)箱4。
本發(fā)明還提供了一種基于上述方案所述固定化裝置的熒光假單胞菌的固定化方法,包括以下步驟:
將滅菌的海藻酸鈉水溶液和熒光假單胞菌菌液混合,得到混合料;
將所述混合液滴加到顆粒形成槽1的乳酸鈣水溶液或氯化鈣水溶液中,進(jìn)行固定化,得到固定化產(chǎn)物,對所述固定化產(chǎn)物進(jìn)行過濾,收集固體組分,得到固定化的熒光假單胞菌。
優(yōu)選的,所述熒光假單胞菌中熒光假單胞菌的有效活菌數(shù)為200億cfu/ml~800億cfu/ml。
優(yōu)選的,所述混合料中海藻酸鈉的質(zhì)量百分含量為1%~1.5%。
優(yōu)選的,所述乳酸鈣水溶液中乳酸鈣的質(zhì)量百分含量為1.5%~2%;所述氯化鈣水溶液中氯化鈣的質(zhì)量百分含量為1.5%~2%。
優(yōu)選的,所述滅菌的海藻酸鈉水溶液中還含有SiO2;所述SiO2的質(zhì)量百分含量為0.05%~0.1%。
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