[發明專利]一種降解廢水中COD的復合菌劑及其制備方法和應用

有效

• 申請號: 202111506623.2
• 申請日: 2021-12-10
• 公開（公告）號: CN114058553B
• 公開（公告）日: 2023-06-23
• 發明（設計）人: 吳娜;劉圣鵬;張大飛;朱威;劉君
• 申請（專利權）人: 青島蔚藍賽德生物科技有限公司
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12N1/04;C02F3/34;C12R1/125;C12R1/10;C12R1/07;C12R1/01;C02F103/24;C02F103/28
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1.一種降解廢水中COD的復合菌劑，其特征在于，每g或每ml的復合菌劑中包含如下活菌數：枯草芽孢桿菌(20-40)×10⁸個、地衣芽孢桿菌(20-40)×10⁸個、解淀粉芽孢桿菌(15-35)×10⁸個和易變副球菌Paracoccus?versutus(5-15)×10⁸個；

其中，所述易變副球菌Paracoccus?versutus保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，保藏編號為：CGMCC?No.23528。

2.根據權利要求1所述的復合菌劑，其特征在于，每g或每ml的復合菌劑包含如下活菌數：枯草芽孢桿菌30×10⁸個、地衣芽孢桿菌30×10⁸個、解淀粉芽孢桿菌20×10⁸個和易變副球菌10×10⁸個。

3.根據權利要求1或2所述的復合菌劑，其特征在于，所述復合菌劑為固體復合菌劑。

4.權利要求1或2所述的復合菌劑的制備方法，其特征在于，包括如下步驟：

(1)一級種子培養：無菌條件下分別取枯草芽孢桿菌、地衣芽孢桿菌、解淀粉芽胞桿菌和易變副球菌接種于富集培養基中，于25-35℃、150-300rpm的條件下培養12-36h，得到一級種子培養液；

(2)二級種子培養：無菌條件下分別將枯草芽孢桿菌、地衣芽孢桿菌、解淀粉芽胞桿菌和易變副球菌的一級種子培養液按照1-5vol％的接種量接種于富集培養基中，于25-35℃、150-300rpm的條件下培養12-36h，得到二級種子培養液；

(3)發酵：待發酵罐內的發酵培養基消毒完畢后，分別將步驟(2)所得的枯草芽孢桿菌、地衣芽孢桿菌、解淀粉芽胞桿菌和易變副球菌的二級種子培養液按照5-10vol％的接種量接種于發酵培養基中，控制溫度為25-35℃，通氣比為1:(1-2)、150-300rpm的條件下發酵，待溶氧開始上升時停止發酵，得各個菌株的發酵液；

(4)制備復合菌劑，不同形態的復合菌劑制備方法如下：

液體復合菌劑：將步驟(3)所得的各個菌株的發酵液進行稀釋，按比例混合灌裝，即得液體復合菌劑；

固體復合菌劑：將步驟(3)所得的各個菌株的發酵液離心后制成菌泥，枯草芽孢桿菌、地衣芽孢桿菌和解淀粉芽胞桿菌的菌泥置于50-70℃的烘箱中烘干，后粉碎制得菌粉，易變副球菌的菌泥中添加保護劑后冷凍干燥，后粉碎制得菌粉，將四種菌種的菌粉按比例混合，即得固體的復合菌劑。

5.根據權利要求4所述的制備方法，其特征在于，

所述富集培養基的組成為：胰蛋白胨10g/L，酵母浸粉5g/L，氯化鈉10g/L，且pH＝6.5-8；

所述枯草芽孢桿菌和地衣芽孢桿菌的發酵培養基組成為：碳源30-80g/L、氮源50-100g/L、K⁺0.3-0.8g/L、Mg²⁺0.5-1.5g/L，且pH＝6.5-8；

所述解淀粉芽胞桿菌的發酵培養基組成為：碳源20-50g/L、氮源10-30g/L、K⁺0.3-0.8g/L、Mg²⁺0.5-1.5g/L，且pH＝6.5-8；

所述易變副球菌的發酵培養基組成為：碳源10-30g/L、氮源3-8g/L、NH₄⁺0.2-0.5g/L、Mg²⁺0.5-1.5g/L、Zn²⁺0.05-0.2g/L、Mn²⁺0.3-0.8g/L，且pH＝6.5-8。

6.根據權利要求5所述的制備方法，其特征在于，所述碳源選自葡萄糖、蔗糖、淀粉、醋酸鈉或丁二酸鈉中的一種或多種；

所述氮源選自酵母浸粉、豆餅粉、蛋白胨、尿素、硫酸銨或硝酸鉀中的一種或多種。

7.根據權利要求4所述的制備方法，其特征在于，所述保護劑為淀粉、甘油或麩皮中的一種或多種。