[發(fā)明專利]一種枳實薤白桂枝湯HPLC特征圖譜構(gòu)建方法

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 202111500237.2
• 申請日: 2021-12-09
• 公開（公告）號: CN114062563A
• 公開（公告）日: 2022-02-18
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 徐云;王盼;鄢必新;徐建;王婷婷
• 申請（專利權(quán)）人: 吉林修正藥業(yè)新藥開發(fā)有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02
• 代理公司: 北京集佳知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11227
• 代理人: 夏菁

1.一種枳實薤白桂枝湯HPLC特征圖譜構(gòu)建方法，包括：

A)取枳實薤白桂枝湯，濃縮、干燥，得到供試品；

B)將供試品采用高效液相色譜法測定，得到枳實薤白桂枝湯HPLC特征圖譜；

所述高效液相色譜法色譜條件為：色譜柱為C18柱；流動相A為乙腈，流動相B為0.05％磷酸溶液，梯度洗脫。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，還包括制備參照物溶液：分別取柚皮苷、新橙皮苷，采用甲醇溶解，得到參照物溶液；

將所述參照物溶液采用高效液相色譜法測定，得到參照物的色譜圖；并根據(jù)參照物的色譜圖對枳實薤白桂枝湯HPLC特征圖譜的成分進行定性。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法，其特征在于，柚皮苷的進樣量在0.46mg～11.50mg之間，新橙皮苷的進樣量在0.448mg～11.20mg之間線性關(guān)系良好。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述梯度洗脫具體為：

0～40min，A相：5％～68％、B相：95％～32％。

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的方法，其特征在于，所述色譜柱為Aglient zorbarx-SB C18柱，規(guī)格為5μm，4.6×250mm；

流動相流速為0.8～1.1mL/min；柱溫28℃～35℃，檢測波長為284nm～288nm；進樣量為5～15μL。

6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的方法，其特征在于，所述流動相流速為0.8mL/min；柱溫35℃，檢測波長為286nm，進樣量為5～10μL。

7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，采用中藥色譜指紋圖譜相似度評價系統(tǒng)對枳實薤白桂枝湯HPLC特征圖譜的相似度進行評價，得到由10個特征峰構(gòu)成的枳實薤白桂枝湯HPLC標準特征圖譜，其中峰1、峰5、峰6歸屬為厚樸藥材，峰2、峰3、峰10歸屬為瓜蔞藥材，峰4、峰6、峰7、峰8、峰11、峰12、峰13、峰14歸屬為枳實藥材；其中峰8為柚皮苷、峰11為新橙皮苷。

8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的方法，其特征在于，在所述標準特征圖譜中，以新橙皮苷峰為參照峰S峰，計算各特征峰與S峰的相對保留時間，所述相對保留時間在規(guī)定值的±2％之內(nèi)，所述規(guī)定值分別為：0.20-峰1、0.32-峰2、0.45-峰3、0.62-峰4、0.73-峰5、0.85-峰6、0.91-峰7、0.95-峰8、0.97-峰9、0.98-峰10、1.00-峰S、1.12-峰12、1.21-峰13、1.43-峰14。

9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，步驟A)所述枳實薤白桂枝湯的制備方法具體為：

取枳實、厚樸加水浸泡，煎煮，用濾布過濾；取薤白，瓜蔞，桂枝，加濾液繼續(xù)煎煮，用濾布過濾得濾液，即得；所述浸泡時間為20～30min；所述濾布的目數(shù)為100目；所述枳實、厚樸與水的質(zhì)量比是9:12:1000；所述薤白，瓜蔞，桂枝和水煎液的質(zhì)量比優(yōu)選為24:12:3:400。

10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的方法，其特征在于，步驟B)所述供試品溶液的制備為采用70％甲醇提取。