[發明專利]一種含有抗菌肽的骨修復材料的制備方法

在審

• 申請號: 202111484093.6
• 申請日: 2021-12-07
• 公開（公告）號: CN114028622A
• 公開（公告）日: 2022-02-11
• 發明（設計）人: 李瑞欣;申靜;李聰;徐小茵;高靜;鄒慧儒;樂鑫;連小麗;代曉華;劉國昌;郭春剛
• 申請（專利權）人: 天津市口腔醫院（天津市整形外科醫院;南開大學口腔醫院）;自然資源部天津海水淡化與綜合利用研究所
• 主分類號: A61L27/54
• 分類號: A61L27/54;A61L27/18;A61L27/22;A61L27/24;A61L27/12;B33Y70/10;B33Y80/00;B33Y10/00
• 代理公司: 天津創智睿誠知識產權代理有限公司 12251
• 代理人: 王融生

1.一種含有抗菌肽的骨修復材料的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：

(1)制備抗菌肽(KSL-W)PLGA微球：

(1-1)稱取聚乳酸-羥基乙酸共聚物，置于燒杯中，加入二氯甲烷溶液，得到PLGA溶液；

(1-2)將抗菌肽(KSL-W)溶解于去離子水中，得到KSL-W溶液，內水相KSL-W溶液的濃度為10mg/mL；

(1-3)將步驟(1-2)得到的KSL-W溶液注入步驟(1-1)中的PLGA溶液中得到混合溶液，將該混合溶液加入高速剪切機中乳化，得到W/O初乳；

(1-4)將步驟(1-3)得到的W/O初乳加入至PVA溶液混合，得到復乳混合液，將該復乳混合液加入高速剪切機中乳化得到W/O/W復乳，將該W/O/W復乳在室溫條件下放置于磁力攪拌器中旋轉蒸發去除W/O/W復乳中多余的二氯甲烷，并用去離子水清洗，冷凍干燥后得到凍干的抗菌肽(KSL-W)PLGA微球；

(2)制備共混凝膠：將步驟(1-4)得到的凍干的抗菌肽(KSL-W)PLGA微球與絲素蛋白溶液、膠原蛋白凝膠、羥基磷灰石在冰浴下共混，得到共混凝膠，其中，抗菌肽(KSL-W)PLGA微球、絲素蛋白、膠原蛋白凝膠、羥基磷灰石占最終骨修復材料的質量百分比為0.001％～3％、30％～60％、20％～40％和9.5％～30％；

(3)建立3D打印模型：通過CT掃描設備對人體需要進行修復的骨骼缺口部位進行三維掃描，并建立該缺口部位的骨骼組織結構的三維數據模型，將三維數據模型導入軟件中轉化為3D打印模型；

(4)將步驟(3)中的3D打印模型導入低溫3D打印軟件中，而后將步驟(2)得到的共混凝膠裝入3D打印機的料筒中，根據設置的打印參數打印出冷凍復合凝膠，而后將冷凍復合凝膠再冷凍干燥進行后處理，最終得到含有抗菌肽的骨修復材料，控制接收裝置的溫度為-20℃～-4℃，冷凝溫度-50℃，真空度10Pa。

2.根據權利要求1所述的含有抗菌肽的骨修復材料的制備方法，其特征在于：所述步驟(1-1)中稱取的聚乳酸-羥基乙酸共聚物的分子量為5.0×10⁴～30×10⁴。

3.根據權利要求1所述的含有抗菌肽的骨修復材料的制備方法，其特征在于：所述步驟(1-4)中，磁力攪拌器的旋轉速度為500-700rpm/s，旋轉攪拌4h。

4.根據權利要求1所述的含有抗菌肽的骨修復材料的制備方法，其特征在于：所述步驟(1-4)中，冷凍干燥的冷凝溫度-50℃，真空度10Pa，時間為3-5h。

5.根據權利要求1所述的含有抗菌肽的骨修復材料的制備方法，其特征在于：所述步驟(2)中，在0℃冰浴下共混5-7h，得到共混凝膠。

6.根據權利要求1所述的含有抗菌肽的骨修復材料的制備方法，其特征在于：所述步驟(4)中的打印參數為：打印針頭直徑為260μm～600μm，針頭行走間距為200μm～800μm。

7.根據權利要求1所述的含有抗菌肽的骨修復材料的制備方法，其特征在于：所述步驟(4)中的后處理方法具體步驟為：先使用無水乙醇浸泡固冷凍干燥后的復合凝膠，再用濃度為0.1～0.5％的氫氧化鈉溶液浸泡，而后用去離子水將復合凝膠上殘留的乙醇和氫氧化鈉沖洗干凈，最終得到含有抗菌肽的骨修復材料。