[發明專利]調控植物花粉管與柱頭識別的硫氧還蛋白及其制備方法

在審

• 申請號: 202111483853.1
• 申請日: 2021-12-07
• 公開（公告）號: CN114149983A
• 公開（公告）日: 2022-03-08
• 發明（設計）人: 代新仁;孟文靜;高新起;李全梓;朱東姿
• 申請（專利權）人: 中國林業科學研究院
• 主分類號: C12N9/02
• 分類號: C12N9/02;C12N15/70;C12Q1/6895
• 代理公司: 北京八月瓜知識產權代理有限公司 11543
• 代理人: 袁曉雨

1.一種調控植物花粉管與柱頭識別的硫氧還蛋白，其特征在于：所述硫氧還蛋白的序列表如SEQ ID No.1或SEQ ID No.2所示。

2.根據權利要求1所述調控植物花粉管與柱頭識別的硫氧還蛋白，其特征在于：所述硫氧還蛋白為含有序列表SEQ ID No.1或SEQ ID No.2的真核重組表達質粒pETrx轉化大腸桿菌DH5α獲得的重組蛋白。

3.根據權利要求1或2所述調控植物花粉管與柱頭識別的硫氧還蛋白的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：

①用引物F1和R1進行PCR擴增cDNA，PCR產物純化后與載體pBS T連接，連接混合液轉化大腸桿菌，得質粒pBSTrx；

②將質粒pBSTrx和質粒pET259用限制性內切酶EcoRV酶切，酶切片段用T4 DNA連接酶連接，連接液轉化入大腸桿菌，得質粒pETrx；

③將質粒pETrx轉化BL21(DE3)，所得轉化子BL21(DE3)/pETrx純化所得重組蛋白，制得氨基酸序列表如SEQ ID No.1或SEQ ID No.2所示的硫氧還蛋白。

4.根據權利要求3所述的制備方法，其特征在于：以擬南芥cDNA為模板。

5.根據權利要求3所述的制備方法，其特征在于：制備SEQ ID No.1所示硫氧還蛋白的插入突變體基因為gr1-1，制備SEQ ID No.2所示硫氧還蛋白的插入突變體基因為nrta-1。

6.根據權利要求5所述的制備方法，其特征在于：gr1-1插入到GR1的第三個內含子序列中，ntra-1插入到NTRA的第1個外顯子序列中。

7.根據權利要求6所述的制備方法，其特征在于：GR1的基因序列表如SEQ ID No.3所示；NTRA的基因序列表如SEQ ID No.4所示。

8.一種如權利要求1或2所述硫氧還蛋白于調控植物花粉管與柱頭識別中的應用。