[發明專利]一種同時檢測六種水稻病毒的試劑盒及其應用

在審

• 申請號: 202111483040.2
• 申請日: 2021-12-07
• 公開（公告）號: CN114410833A
• 公開（公告）日: 2022-04-29
• 發明（設計）人: 黃靜;吳建國
• 申請（專利權）人: 漳州職業技術學院
• 主分類號: C12Q1/70
• 分類號: C12Q1/70;C12Q1/686;C12N15/11
• 代理公司: 泉州市潭思專利代理事務所(普通合伙) 35221
• 代理人: 何碧明

本發明公開了一種同時檢測六種水稻病毒的試劑盒及其應用，屬于農業技術領域。所述試劑盒包括：用于檢測水稻鋸齒葉矮縮病毒RRSV的引物組、用于檢測水稻條紋病毒RSV的引物組、用于檢測水稻矮縮病毒RDV的引物組、用于檢測南方水稻黑條矮縮病毒SRBSDV的引物組、用于檢測水稻黑條矮縮病毒RBSDV的引物組、用于檢測水稻草狀矮化病毒RGSV的引物組。本發明的試劑盒可以方便快捷可靠的同時檢測6種水稻病毒，既節省了檢測成本，又可快速得到結果，減少工作量，可進行細致而深入的病毒病學研究，為更好的研究水稻田間病害的發病和傳毒介體的帶毒率，為病害的測報和防控提供了有利抓手，為大規模突發性病毒病暴發時病因的溯源打下了良好的技術基礎，具有廣闊的應用前景。

技術領域

本發明屬于農業技術領域，具體涉及一種同時檢測六種水稻病毒的試劑盒及其應用。

背景技術

水稻(Oryza sativa L.)是世界上一半人口的主食來源。水稻病毒病作為農業生產上的重要病害之一，在我國、日本、韓國、印度、菲律賓、越南等國家以及非洲水稻產區普遍發生(Uehara-Ichiki et al.,2013a)。水稻病毒不僅僅侵染水稻，還侵染玉米，小麥等禾本科植物，寄主范圍廣；其次，水稻新老病毒輪番發生，新的病毒不斷被發現，老的病毒潛伏發生，由于水稻抗病毒免疫品種缺乏，水稻病毒病尚不能有效徹底的控制，始終威脅著農業生產，帶來了極大的安全隱患并造成重大的經濟損失。

目前世界報道的水稻病毒有17種，在我國發生過的有12種之多。當前在生產上能夠采到的有水稻條紋病毒(Rice stripe virus,RSV)、水稻草狀矮化病毒(Rice grassystunt virus, RGSV)、水稻矮縮病毒(Rice dwarf virus,RDV)、水稻鋸齒葉矮縮病毒(Riceragged stunt virus, RRSV)、水稻黑條矮縮病毒(Rice black-streaked dwarf virus,RBSDV)、南方水稻黑條矮縮病毒(Southern rice black-streaked dwarf virus,SRBSDV)、水稻瘤矮病毒(Rice gall dwarf virus, RGDV)和水稻條紋花葉病毒(Rice stripemosaic virus,RSMV)等8種水稻病毒病害。這些水稻病毒的感染大多會引起水稻植株的矮化，分蘗增多，葉色濃綠卷曲，葉片僵直等相似的病害癥狀，然而，當同一水稻植株上出現多種不同癥狀表現時，很難通過病害癥狀來進行診斷。

在南方水稻產區RDV、RSV、SRBSDV、RRSV、RGSV、RBSDV常年發生混合侵染，早期侵染癥狀相似，這極其容易導致病毒的誤診?？焖倬珳试\斷對于有效預防和控制侵染初期的病害流行具有重要意義，如果出現判斷錯誤，很有可能影響生產實踐，因此有必要建立一種可快速高效精準檢測多種病毒的PCR體系。每種水稻病毒都包含一個dsRNA或ssRNA 基因組。RDV、SRBSDV、RBSDV和RRSV包含10-12個片段的dsRNA(Hibino,1996)，RSV 和RGSV包含4-6條ssRNA基因組，其病毒的序列同源性均有差異。SRBSDV和RBSDV是同源性最高的，它們最保守的成分(片段1，2和10)有78.5％–79.2％相似度(Wang et al.,2010)。其他幾種病毒基因組與SRBSDV和RBSDV的基因組有顯著差異。因此，根據這些病毒的基因組序列差異設計每種病毒的特異引物，建立一種同時檢測這6種病毒的方法，對于監測傳毒介體帶毒、病害流行等生產實踐具有重要意義。

發明內容

本發明的目的是提供一種同時檢測六種水稻病毒的試劑盒及其應用。

為了實現上述目的，本發明采用以下技術方案：

一種同時檢測六種水稻病毒的試劑盒，包括：用于檢測水稻鋸齒葉矮縮病毒RRSV的引物組、用于檢測水稻條紋病毒RSV的引物組、用于檢測水稻矮縮病毒RDV的引物組、用于檢測南方水稻黑條矮縮病毒SRBSDV的引物組、用于檢測水稻黑條矮縮病毒RBSDV的引物組、用于檢測水稻草狀矮化病毒RGSV的引物組；