[發明專利]具有增強的碳水化合物的高強度酸性Α-葡糖苷酶

在審

• 申請號: 202111483006.5
• 申請日: 2015-09-30
• 公開（公告）號: CN114540327A
• 公開（公告）日: 2022-05-27
• 發明（設計）人: 拉塞爾·戈喬爾;H·杜
• 申請（專利權）人: 阿米庫斯治療學公司
• 主分類號: C12N9/26
• 分類號: C12N9/26;C12N5/10;A61K38/47;A61P3/08;A61P43/00
• 代理公司: 北京律誠同業知識產權代理有限公司 11006
• 代理人: 徐金國;吳啟超

1.一種源自CHO細胞的rhGAA組合物，該rhGAA組合物包含比通過(阿葡糖苷酶α；CAS 420794-05-0)所例示的常規rhGAA更高量的rhGAA，該更高量的rhGAA包含攜帶單-甘露糖-6-磷酸(M6P)或雙-M6P的N-聚糖。

2.如權利要求1所述的rhGAA組合物，其中該rhGAA包括與通過SEQ ID NO:1所述的氨基酸序列具有至少95％一致性的氨基酸序列。

3.如權利要求1所述的rhGAA組合物，其中30％或更多的rhGAA結合至陽離子非依賴性甘露糖-6-磷酸受體(CIMPR)，或者30％或更多的rhGAA包含攜帶單-M6P或雙-M6P的N-聚糖。

4.如權利要求1所述的rhGAA組合物，其中50％或更多的rhGAA結合至陽離子非依賴性甘露糖-6-磷酸受體(CIMPR)，或者50％或更多的rhGAA包含攜帶單-M6P或雙-M6P的N-聚糖。

5.如權利要求1所述的rhGAA組合物，其中90％至100％的rhGAA結合至陽離子非依賴性甘露糖-6-磷酸受體(CIMPR)，或者90％至100％或更多的rhGAA包含攜帶單-M6P或雙-M6P的N-聚糖。

6.如權利要求1所述的rhGAA組合物，其中攜帶M6P的N-聚糖的平均含量范圍是從0.5至7.0mol/mol rhGAA。

7.如權利要求1所述的rhGAA組合物，其中攜帶M6P的N-聚糖的平均含量范圍是從1.0至4.0mol/mol rhGAA。

8.如權利要求1所述的rhGAA組合物，其中攜帶M6P的N-聚糖的平均含量范圍是從5.0至6.0mol/mol rhGAA。

9.如權利要求1所述的rhGAA組合物，其中平均來說，這些N-聚糖包含大于3mol/mol的M6P和大于4mol/mol的唾液酸。

10.如權利要求1所述的rhGAA組合物，其中平均來說，該rhGAA上的40％至60％的N-聚糖是復合型N-聚糖；其中該rhGAA上的不超過6.5％的N-聚糖是雜合型N-聚糖，并且其中該rhGAA上的不超過15％的高甘露糖型N-聚糖是非磷酸化的，該rhGAA上的至少10％的高甘露糖型N-聚糖是單-M6P磷酸化的，和/或該rhGAA上的至少2％的高甘露糖型N-聚糖是雙-M6P磷酸化的。

11.如權利要求1所述的組合物，其中該rhGAA平均攜帶2.0至8.0個唾液酸殘基/mol的rhGAA。

12.如權利要求1所述的組合物，其中該rhGAA由CHO細胞系ATB200-001-X5-14或由其次代培養物產生。

13.如權利要求1所述的組合物，進一步包括一種分子伴侶。

14.一種用于制造如權利要求1所述的組合物的方法，包括培養CHO細胞系并從CHO細胞培養物中回收所述組合物。

15.一種產生如權利要求1所述的組合物的CHO細胞系。

16.產生如權利要求1所述的組合物的CHO細胞系GA-ATB-200或其次代培養物。