[發明專利]以p16/Ki-67、MCM2為靶標的宮頸癌檢測試劑盒及其判讀方法

在審

• 申請號: 202111480640.3
• 申請日: 2021-12-06
• 公開（公告）號: CN114184788A
• 公開（公告）日: 2022-03-15
• 發明（設計）人: 李克強;姚遠颋;許舟;顧重建
• 申請（專利權）人: 重慶沃康生物科技有限公司
• 主分類號: G01N33/574
• 分類號: G01N33/574
• 代理公司: 重慶西南華渝專利代理有限公司 50270
• 代理人: 熊禮

1.以p16/Ki-67、MCM2為靶標的宮頸癌檢測試劑盒，其特征在于，包括p16/Ki-67一抗工作混合液、MCM2一抗工作液、羊抗鼠/兔二抗工作混合液、DAB工作混合液、RED工作混合液和蘇木素。

2.根據權利要求1所述的以p16/Ki-67、MCM2為靶標的宮頸癌檢測試劑盒，其特征在于，p16/Ki-67一抗工作混合液包括抗體稀釋液、p16一抗濃縮液和Ki-67一抗濃縮液；MCM2一抗工作液包括抗體稀釋液和MCM2一抗濃縮液；羊抗鼠/兔二抗工作混合液包括羊抗鼠二抗工作液和羊抗兔二抗工作液；DAB工作混合液包括DAB染色底物、DAB染色緩沖液；RED工作混合液包括AP-red顯色緩沖液、AP-red色原濃縮液。

3.根據權利要求1或2所述的以p16/Ki-67、MCM2為靶標的宮頸癌檢測試劑盒的判讀方法，其特征在于，宮頸細胞采樣后制備兩張宮頸脫落細胞切片，分別為切片1和切片2；

采用p16/Ki-67一抗工作混合液、羊抗鼠/兔二抗工作混合液、DAB工作混合液、RED工作混合液、蘇木素對切片1進行p16/Ki-67免疫組織化學染色；

采用MCM2一抗工作液、羊抗兔二抗工作液、RED工作混合液、蘇木素對切片2進行MCM2免疫組織化學染色；

結合染色結果、細胞數量和細胞核面積，得出判定結果，具體如上表所示。

4.根據權利要求3所述的以p16/Ki-67、MCM2為靶標的宮頸癌檢測試劑盒的判讀方法，其特征在于，配制p16/Ki-67一抗工作混合液：首先將抗體稀釋液和p16一抗濃縮液混合，再加入到Ki-67一抗濃縮液中。

5.根據權利要求3所述的以p16/Ki-67、MCM2為靶標的宮頸癌檢測試劑盒的判讀方法，其特征在于，配制MCM2一抗工作液：首先將抗體稀釋液和MCM2一抗濃縮液混合。

6.根據權利要求3所述的以p16/Ki-67、MCM2為靶標的宮頸癌檢測試劑盒的判讀方法，其特征在于，配制羊抗鼠/兔二抗工作混合液：將羊抗鼠二抗工作液加入羊抗兔二抗工作液中混合。

7.根據權利要求3所述的以p16/Ki-67、MCM2為靶標的宮頸癌檢測試劑盒的判讀方法，其特征在于，配制DAB工作混合液：DAB染色底物和DAB染色緩沖液混勻得到。

8.根據權利要求3所述的以p16/Ki-67、MCM2為靶標的宮頸癌檢測試劑盒的判讀方法，其特征在于，配制DAB工作混合液：AP-red顯色緩沖液和AP-red色原濃縮液混勻得到。

9.根據權利要求3所述的以p16/Ki-67、MCM2為靶標的宮頸癌檢測試劑盒的判讀方法，其特征在于，對切片1進行p16/Ki-67免疫組織化學染色：將p16/Ki-67一抗工作混合液添加到切片1上，然后在切片1上再添加羊抗鼠/兔二抗工作混合液；最后依次添加DAB工作混合液、RED工作混合液和蘇木素進行染色。

10.根據權利要求3所述的以p16/Ki-67、MCM2為靶標的宮頸癌檢測試劑盒的判讀方法，其特征在于，對切片2進行MCM2免疫組織化學染色：將MCM2一抗工作液添加到切片2上，然后在切片2上再添加羊抗兔二抗工作混合液；最后依次添加RED工作混合液和蘇木素進行染色。