[發明專利]一種獲得性再生障礙性貧血模型小鼠的生產方法

在審

• 申請號: 202111457226.0
• 申請日: 2021-12-01
• 公開（公告）號: CN114027263A
• 公開（公告）日: 2022-02-11
• 發明（設計）人: 焦丹麗;劉特;趙琛;石健菲;李蔚江;劉世敏;戚莉
• 申請（專利權）人: 上海中醫藥大學
• 主分類號: A01K67/027
• 分類號: A01K67/027
• 代理公司: 上海精晟知識產權代理有限公司 31253
• 代理人: 馮子玲

本發明公開了一種獲得性再生障礙性貧血模型小鼠的生產方法，包括對小鼠每日腹腔注射一次環磷酰胺和環孢霉素，所述環磷酰胺的用量為50mg/kg/d，所述環孢霉素的用量為5mg/kg/d，所述環磷酰胺和環孢霉素的注射間隔時間為3～5分鐘，連續注射14天。本發明的方法生產的獲得性再生障礙性貧血模型小鼠可用于研究獲得性再生障礙性貧血。

技術領域

本發明屬于醫藥領域，特別是涉及一種獲得性再生障礙性貧血動物模型的生產方法。

背景技術

再生障礙性貧血(aplastic anemia，AA)是一種以骨髓造血組織減少、骨髓造血功能下降、全血細胞減少為特征的惡性血液系統疾病。再生障礙性貧血可分為先天性和獲得性兩大類。先天性AA是一種遺傳性疾病，主要由FA基因突變導致。獲得性AA的發病機制包括造血干細胞缺陷、造血微環境損傷以及免疫功能異常。先天性再生障礙性貧血模型的建立成本高且技術難度大，一般實驗室難以完成。獲得性AA動物模型針對不同的發病機制采用不同方法建立，包括化學、物理、免疫介導、物理免疫介導法和物理化學結合法等。如采用化學試劑的造模方法，可能存在外周血項指標無統計學意義，維持時間短，一定時間內小鼠可自行修復，不符合獲得性再障的臨床診斷指標等缺點。物理射線、病毒感染、淋巴細胞輸注等造模方法雖然可以成功制作符合AA病理特點的模型，但是存在著實驗成本高、操作復雜、模型小鼠死亡率高、小鼠生存期短，不能滿足實驗藥物療效觀察的等弊端。化學試劑聯合物理射線法，特別要考慮小鼠射線照射的劑量，把控化學藥物的計量，且操作復雜，造模成本較高，且改造模方法可造成造血干細胞或造血微環境損傷。

發明內容

本發明提供了一種獲得性再生障礙性貧血模型小鼠的生產方法，包括對小鼠每日腹腔注射一次環磷酰胺和環孢霉素，所述環磷酰胺的用量為50mg/kg/d，所述環孢霉素的用量為5mg/kg/d，所述環磷酰胺和環孢霉素的注射間隔時間為3～5分鐘，連續注射14天。

在一優選例中，所述環磷酰胺和環孢霉素的注射間隔時間為4分鐘。

本發明采用腹腔注射環磷酰胺和環孢霉素制備獲得性AA小鼠模型，造模藥物易獲取，造模方法操作簡單，可替代物理射線、病毒感染等造模方法。經驗證，當環磷酰胺聯合環孢霉素腹腔連續注射14天后，小鼠外周血項變化、骨髓病理改變、脾臟免疫變化均達到獲得性再生障礙性貧血的診斷標準，且該造模方法只需腹腔注射、操作簡便、成功率高、維持時間較長，實驗動物死亡率低，模型穩定持久，可作為獲得性再生障礙性貧血發病機制及治療研究的小鼠模型。

本發明各個方面的細節將在隨后的章節中得以詳盡描述。通過下文以及權利要求的描述，本發明的特點、目的和優勢將更為明顯。

附圖說明

圖1為實施例各組骨髓細胞形態a.對照組b.模型組

圖2為實施例各組骨髓組織病理學檢查a.對照組b.模型組

圖3為各組小鼠脾臟組織病理學觀察a.對照組b.模型組

具體實施方式

下面結合具體實施例，進一步闡述本發明。應理解，這些實施例僅用于說明本發明而不用于限制本發明的范圍。下列實施例中所使用的試劑和原料均可通過商業途徑購買獲得。下列實施例中未注明具體條件的實驗方法，通常按照常規條件或按照制造廠商所建議的條件。除非另行定義，文中所使用的所有專業與科學用語與本領域熟練人員所熟悉的意義相同。此外，任何與所記載內容相似或均等的方法及材料皆可應用于本發明方法中。文中所述的較佳實施方法與材料僅作示范之用。

本發明提到的上述特征，或實施例提到的特征可以任意組合。本專利說明書所揭示的所有特征可與任何組合物形式并用，說明書中所揭示的各個特征，可以任何可提供相同、均等或相似目的的替代性特征取代。因此除有特別說明，所揭示的特征僅為均等或相似特征的一般性例子。

實施例

實驗動物及材料